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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问表达载体pPIC9K里有几个XhoI的酶切位点？
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sweet561

银虫 (小有名气)

[交流] 请问表达载体pPIC9K里有几个XhoI的酶切位点？ 已有6人参与

目前，做毕赤酵母表达系统，用的表达载体是pPIC9K，用到了XhoI和EcoRI的酶切位点，但最后没有表达，中间也缺少了些验证，所以可能是构建时出了问题，想请教一下pPIC9K里有几个XhoI的没酶切位点，因为有看到别人说，pPIC9K里有两个酶切位点，但质粒的序列里面只看到一个，所以请大家帮忙确定一下，谢谢！
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1楼 2013-10-26 14:23:38
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谢伊莹

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-27 01:36:50
英俊说明书里有两个，分别在1193和5710bp
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2楼2013-10-26 16:12:48
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王者归来001

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-10-27 01:37:05
先去ncbi上找到这个载体，仔细分析一下它的多克隆位点区，对于你引物酶切位点的添加有所帮助
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坚持不懈,终会成功!
3楼2013-10-26 22:37:47
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phoenix211

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
记得好像多克隆位点上没有这个酶切位点吧
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4楼2013-10-28 15:16:51
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水墨蓝

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
下个质粒的图谱 看看
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5楼2013-10-28 15:32:06
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sunpengyu611

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-29 01:35:42
确实有两个，多克隆位点上有一个，好像是在his还是kan的基因上还有一个，毕业了记不得了，所以最好不要用xho1，构载体时候很麻烦的~~~~~~~·
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6楼2013-10-28 16:42:41
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sunpengyu611

银虫 (小有名气)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-10-29 01:36:08
哦对，是kan的基因上还有一个xho1，所以pic9可以用xho1，pic9上只有一个xho1
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7楼2013-10-28 16:44:29
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-29 01:36:37
引用回帖:
7楼: Originally posted by sunpengyu611 at 2013-10-28 16:44:29
哦对，是kan的基因上还有一个xho1，所以pic9可以用xho1，pic9上只有一个xho1

可以确认的告诉你，两个，以前吃过苦头的，图谱上只能看到一个，但是你下载全序列可以发现是两个。
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8楼2013-10-28 21:26:59
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sweet561

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lxj341401 at 2013-10-28 21:26:59
可以确认的告诉你，两个，以前吃过苦头的，图谱上只能看到一个，但是你下载全序列可以发现是两个。...

谢谢！
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9楼2013-10-30 11:39:16
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