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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 利福平的HPLC分析
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亦心百合

金虫 (小有名气)

[求助] 利福平的HPLC分析

请教各位大侠，HPLC分析利福平，流动相为甲醇：水，但是利福平标准品总是有拖尾，试了很多条件，还是没办法改善，请问大家有谁做过这个的，给个建议。谢谢！（我用的是ZORBAX C18（4.6x150mm）的色谱柱）。
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1楼 2013-10-23 21:04:00
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 谢谢应助 2013-10-25 06:40:29
查询Pka，确定酸碱性，加入二乙安或者三乙酸，调整峰形

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2楼2013-10-23 22:56:32
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亦心百合

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wyy080214 at 2013-10-23 22:56:32
查询Pka，确定酸碱性，加入二乙安或者三乙酸，调整峰形

谢谢你，我用了三乙胺和磷酸，但是单向阀容易被堵，效果不好，也用了醋酸钠，还是有点拖尾。
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3楼2013-10-24 21:16:01
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亦心百合

金虫 (小有名气)
看到有很多文献用磷酸盐，但总是堵单向阀。
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4楼2013-10-24 21:17:52
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 亦心百合 at 2013-10-24 21:16:01
谢谢你，我用了三乙胺和磷酸，但是单向阀容易被堵，效果不好，也用了醋酸钠，还是有点拖尾。...

使用磷酸盐，水相不能小于百分之七十，不然析出，堵

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5楼2013-10-24 23:15:24
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hexued6933

版主 (著名写手)

日出东方，岂能不败

优秀版主优秀版主优秀版主
楼主有机相比例很高吧。增强洗脱能力可以加thf或异丙醇，调节脱尾可以更换封尾更好的色谱柱或加三乙胺调节。推荐：0.2％三乙胺水溶液，再加10％thf。磷酸调ph?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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大家好，才是真的好
6楼2013-10-25 08:16:47
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亦心百合

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wyy080214 at 2013-10-24 23:15:24
使用磷酸盐，水相不能小于百分之七十，不然析出，堵
...

我用的水相是40%的，每次都堵，刚开始还以为是血样的原因了。
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7楼2013-10-25 21:32:49
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亦心百合

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hexued6933 at 2013-10-25 08:16:47
楼主有机相比例很高吧。增强洗脱能力可以加thf或异丙醇，调节脱尾可以更换封尾更好的色谱柱或加三乙胺调节。推荐：0.2％三乙胺水溶液，再加10％thf。磷酸调ph?
...

有机相60%，只有一根柱子，如果加的缓冲盐太多（0.2％三乙胺水溶液，再加10％thf。磷酸调ph），条件不好控制，保留时间不稳定。我刚开始用的三乙胺-磷酸，由于操作误差，保留时间特别不稳定。
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8楼2013-10-25 21:36:57
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