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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌悬液用液体无机盐培养基制备行吗？
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wjg811

木虫 (小有名气)

[求助] 菌悬液用液体无机盐培养基制备行吗？

对于菌悬液的制备，看了下书和一些帖子。归纳下，可分为2种方法。1.斜面培养基上的菌体加入生理盐水或磷酸缓冲液后，用接种环刮菌苔，震荡均匀得到一定浓度菌悬液。2.用LB或牛肉膏蛋白培养基培养到稳定期时，离心收集菌体，再用生理盐水或磷酸缓冲液洗菌体3次后重悬，制得菌悬液。我想问，能不能用无机盐培养基（液体）代替生理盐水或磷酸缓冲液做菌悬液？并且进一步用比浊法在菌密度和OD600之间建立的标准曲线？
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1楼 2013-10-23 15:46:15
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chenbo1027

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wjg811: 金币+8 2013-10-31 11:50:13
wjg811: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-10-31 11:51:42
引用回帖:
3楼: Originally posted by wjg811 at 2013-10-24 00:33:05
我是用于做实验的，文献中多用磷酸缓冲液做成菌悬液，接入新的无机盐培养基培养。然后，我想，磷酸缓冲液制备的菌悬液加入新的无机盐培养基肯定改变了无机盐培养基的成分，多少对菌体的培养有些影响，那直接用无机 ...

按照你说的，我感觉，如果还要洗涤离心那就用缓冲液好了，如果不需要洗涤那就用无机盐也可以
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5楼2013-10-24 09:51:12
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chenbo1027

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+4, 鼓励热心应助！ 2013-10-23 22:37:24
还要看你的菌悬液制备的目的，一般用于保存的需要尽量降低代谢水平  所以多用无菌水或甘油
如果是用来实验  在不影响实验效果的情况下  也是可以的  至于对实验有没有影响
还应该看整个实验流程涉及的所有环节
例如平板计数的算菌浓的话，无机盐离子会不会使菌体发生移动而影响计数也是不好说的
所以最好还是简单一点的好
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2楼2013-10-23 17:17:48
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wjg811

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenbo1027 at 2013-10-23 17:17:48
还要看你的菌悬液制备的目的，一般用于保存的需要尽量降低代谢水平  所以多用无菌水或甘油
如果是用来实验  在不影响实验效果的情况下  也是可以的  至于对实验有没有影响
还应该看整个实验流程涉及的所有环节
例 ...

我是用于做实验的，文献中多用磷酸缓冲液做成菌悬液，接入新的无机盐培养基培养。然后，我想，磷酸缓冲液制备的菌悬液加入新的无机盐培养基肯定改变了无机盐培养基的成分，多少对菌体的培养有些影响，那直接用无机盐培养基制成菌悬液不是更好？
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3楼2013-10-24 00:33:05
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yangjun130

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wjg811: 金币+5 2013-10-31 11:49:48
文献中为什么要那样，肯定是计算好的，不了。你要想清楚为什么要那样

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4楼2013-10-24 06:10:44
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