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蓝Bud

新虫 (初入文坛)

[求助] 低熔点琼脂糖

低熔点琼脂糖什么情况下使用？
biowrst agarose regular是指高熔点琼脂糖吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2013-10-14 16:36:10
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m_marion

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+3, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-14 17:04:20
需要将活菌固定在琼脂培养基内部的时候使用，也就是将低熔点琼脂糖粉末加入液体培养基中，
55度水浴融化后放入设定为标称熔点的水浴——通常是37度，待热平衡。（注意由于这不是标准的晶体物质，
标称37度熔点的话，加热到40度维持很长时间都可能不融化，而降温到35度维持很长时间也可以不凝固。）

最典型的是顶层琼脂法实验中：
将活菌稀释溶液加入37度的融化状态的培养基摇匀，不会损伤细菌，同时也能保持液态因而能混合均匀。
再将摇匀的接种的液体培养基倒在事先准备好的普通琼脂平板上（可带抗性），室温下任其凝固，
就获得了固定于顶层琼脂中的分散的细菌，可以放入37度培养箱培养，顶层琼脂在37度培养过程中不会融化。
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2楼2013-10-14 16:56:38
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m_marion

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

此外，为了方便溶胶，我做实验的时候同样使用低熔点琼脂糖跑DNA的琼脂糖电泳分离

当然这样做的时候尤其是夏天需要小心电泳槽的水温，长时间电泳分离的时候电泳槽水温会很高，
低熔点琼脂糖胶会软化，跑出来的条带形状就模糊了。夏天我都用冰袋给电泳槽降温。
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3楼2013-10-14 17:04:45
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蓝Bud

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by m_marion at 2013-10-14 16:56:38
需要将活菌固定在琼脂培养基内部的时候使用，也就是将低熔点琼脂糖粉末加入液体培养基中，
55度水浴融化后放入设定为标称熔点的水浴——通常是37度，待热平衡。（注意由于这不是标准的晶体物质，
标称37度熔点的话 ...

哦，这样啊，谢谢 ，我是想用于分子方面
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4楼2013-10-17 17:34:15
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蓝Bud

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by m_marion at 2013-10-14 17:04:45
此外，为了方便溶胶，我做实验的时候同样使用低熔点琼脂糖跑DNA的琼脂糖电泳分离

当然这样做的时候尤其是夏天需要小心电泳槽的水温，长时间电泳分离的时候电泳槽水温会很高，
低熔点琼脂糖胶会软化，跑出来的条 ...

很贵啊，你用的什么牌子呢？我是想分离200bp和180bp的DNA
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5楼2013-10-17 17:35:37
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