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蓝Bud

新虫 (初入文坛)

[求助] 低熔点琼脂糖

低熔点琼脂糖什么情况下使用?
biowrst agarose regular是指高熔点琼脂糖吗?

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m_marion

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+3, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-14 17:04:20
需要将活菌固定在琼脂培养基内部的时候使用,也就是将低熔点琼脂糖粉末加入液体培养基中,
55度水浴融化后放入设定为标称熔点的水浴——通常是37度,待热平衡。(注意由于这不是标准的晶体物质,
标称37度熔点的话,加热到40度维持很长时间都可能不融化,而降温到35度维持很长时间也可以不凝固。)

最典型的是顶层琼脂法实验中:
将活菌稀释溶液加入37度的融化状态的培养基摇匀,不会损伤细菌,同时也能保持液态因而能混合均匀。
再将摇匀的接种的液体培养基倒在事先准备好的普通琼脂平板上(可带抗性),室温下任其凝固,
就获得了固定于顶层琼脂中的分散的细菌,可以放入37度培养箱培养,顶层琼脂在37度培养过程中不会融化。
2楼2013-10-14 16:56:38
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m_marion

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

此外,为了方便溶胶,我做实验的时候同样使用低熔点琼脂糖跑DNA的琼脂糖电泳分离

当然这样做的时候尤其是夏天需要小心电泳槽的水温,长时间电泳分离的时候电泳槽水温会很高,
低熔点琼脂糖胶会软化,跑出来的条带形状就模糊了。夏天我都用冰袋给电泳槽降温。
3楼2013-10-14 17:04:45
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蓝Bud

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by m_marion at 2013-10-14 16:56:38
需要将活菌固定在琼脂培养基内部的时候使用,也就是将低熔点琼脂糖粉末加入液体培养基中,
55度水浴融化后放入设定为标称熔点的水浴——通常是37度,待热平衡。(注意由于这不是标准的晶体物质,
标称37度熔点的话 ...

哦,这样啊,谢谢 ,我是想用于分子方面
4楼2013-10-17 17:34:15
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蓝Bud

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by m_marion at 2013-10-14 17:04:45
此外,为了方便溶胶,我做实验的时候同样使用低熔点琼脂糖跑DNA的琼脂糖电泳分离

当然这样做的时候尤其是夏天需要小心电泳槽的水温,长时间电泳分离的时候电泳槽水温会很高,
低熔点琼脂糖胶会软化,跑出来的条 ...

很贵啊,你用的什么牌子呢?我是想分离200bp和180bp的DNA
5楼2013-10-17 17:35:37
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