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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » westen blot检测caspase-3
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seasonin

银虫 (小有名气)

[交流] westen blot检测caspase-3

大家好，之前制的蛋白样品作用于昆虫中肠细胞，经DNA ladder检测可以判定细胞经蛋白孵育后，发生凋亡。当我把孵育后的细胞破碎之后，取上清做caspase-3的western blot检测并没有发现有信号，不知何解？
我猜想虽然caspase-3虽然在大多数物种中高度保守，是不是也存在物种间的特异性呢？我用的一抗是epitomics的rabbit monoclonal antibody,还请各位多多指教。
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1楼 2013-10-12 10:58:10
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雷遁卡卡

新虫 (初入文坛)
★
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我想知道你中肠蛋白孵育的条件是什么？缓冲液、时间、ph、温度什么的。。。
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2楼2013-10-29 09:43:45
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qianjinyu

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
物种之间还是差别很大的吧
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3楼2013-10-29 11:27:10
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seasonin

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 雷遁卡卡 at 2013-10-29 09:43:45
我想知道你中肠蛋白孵育的条件是什么？缓冲液、时间、ph、温度什么的。。。

大概就是磷酸盐缓冲液。孵育时间是两小时，4摄氏度孵育
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4楼2013-10-29 20:05:16
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seasonin

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by qianjinyu at 2013-10-29 11:27:10
物种之间还是差别很大的吧

可能是吧
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5楼2013-10-29 20:05:39
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qianjinyu

铜虫 (初入文坛)
★
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把两个物种的caspase3的序列对比一下就知道了
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6楼2013-10-30 11:56:15
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