应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提质粒，跑电泳发现量很少怎么回事？
81/1返回列表
查看: 1800  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

天湖酒

新虫 (初入文坛)

[求助] 提质粒，跑电泳发现量很少怎么回事？

我就是用试剂盒，按照说明书提的质粒，是两个菌的两个质粒一起提的，会有哪些可能导致提的质粒量很少呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-11 20:43:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-11 22:36:45
操作的方法，不是说你按照说明书上操作就可以，提取的过程中速度要快，在这就是混匀的时候动作要尽量轻柔，不要剧烈混匀，
赞一下 回复此楼
2楼2013-10-11 21:18:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是高拷贝质粒还是低拷贝质粒？收的菌生长状态如何？
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-11 23:54:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

929519755

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、菌体数量多少
2、试剂盒是否过期
3、操作是否正确
赞一下 回复此楼
想你没话说
4楼2013-10-12 08:39:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
还有，跑电泳的时候，拿标准跑对照了吗？ 直接测一下，浓度多少，260/280的比例如何
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
5楼2013-10-12 11:59:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyongliangx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
分析一下：你量少有两个原因，一，可能是质料本身就少；二，你提的过程中操作不好。
给你的建议是：一，可以多提点菌液，比如原来你只用了1ML的菌液，那现在你可以用3ml 5ml 甚至更多。只要重复的离心菌液就行了。
                     二，操作过程中，动作要温和，其中加碱和酸的这两步比较关键，可能试剂盒里有不同的名字比如QIA的叫P2,N3 ，天根的好像是叫P2,P3。 加碱上下颠倒几次，要轻柔。时间不要超过3min ，然后加酸中和就行了。

                     三，最后你就得检查下你的试剂盒是不是有问题，比如 wash buffer 是不是没有问题的。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2013-10-12 16:25:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
原因：菌体种类，摇菌的毫升数，以及你的质粒拷贝数是一个。举例：
我提的是pbad-hisa/myc,从20ml的菌液中提质粒，40微升溶解质粒，浓度为103ng/μl，我不会贴图要么就可以吧图给你看看了。
赞一下 回复此楼
应助之星就是我~没错。你没有看错~
7楼2013-10-12 20:13:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王者归来001

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
天湖酒: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-10-13 17:15:13
原因：1 菌体的类型，表达菌株的质粒量就很少；
2 试剂盒上的要求很重要，裂解菌体是否充分很重要，菌体过多就需要多加裂解液，否则质粒产量就会很低；
3 过柱时可放置5min，便于膜吸附质粒；
4  洗脱质粒时可重复洗两次。
赞一下(2人) 回复此楼
坚持不懈,终会成功!
8楼2013-10-12 21:53:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 天湖酒 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856求调剂 +5 zhn03 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:58 by peike
[考研] 材料调剂 5+3 想要一壶桃花水 2026-03-25 6/300 2026-03-25 18:20 by xcjcqu
[考研] 359求调剂 +3 王了个楠 2026-03-25 3/150 2026-03-25 12:50 by Dyhoer
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 271求调剂 +4 生如夏花… 2026-03-22 4/200 2026-03-25 11:25 by userper
[考研] 求调剂323材料与化工 +4 1124361 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:19 by shulmg
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 一志愿深大，0703化学，总分302，求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭