应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提质粒，跑电泳发现量很少怎么回事？
81/1返回列表
查看: 1797  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

天湖酒

新虫 (初入文坛)

[求助] 提质粒，跑电泳发现量很少怎么回事？

我就是用试剂盒，按照说明书提的质粒，是两个菌的两个质粒一起提的，会有哪些可能导致提的质粒量很少呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-11 20:43:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-11 22:36:45
操作的方法，不是说你按照说明书上操作就可以，提取的过程中速度要快，在这就是混匀的时候动作要尽量轻柔，不要剧烈混匀，
赞一下 回复此楼
2楼2013-10-11 21:18:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是高拷贝质粒还是低拷贝质粒？收的菌生长状态如何？
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-11 23:54:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

929519755

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、菌体数量多少
2、试剂盒是否过期
3、操作是否正确
赞一下 回复此楼
想你没话说
4楼2013-10-12 08:39:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
还有，跑电泳的时候，拿标准跑对照了吗？ 直接测一下，浓度多少，260/280的比例如何
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
5楼2013-10-12 11:59:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyongliangx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
分析一下：你量少有两个原因，一，可能是质料本身就少；二，你提的过程中操作不好。
给你的建议是：一，可以多提点菌液，比如原来你只用了1ML的菌液，那现在你可以用3ml 5ml 甚至更多。只要重复的离心菌液就行了。
                     二，操作过程中，动作要温和，其中加碱和酸的这两步比较关键，可能试剂盒里有不同的名字比如QIA的叫P2,N3 ，天根的好像是叫P2,P3。 加碱上下颠倒几次，要轻柔。时间不要超过3min ，然后加酸中和就行了。

                     三，最后你就得检查下你的试剂盒是不是有问题，比如 wash buffer 是不是没有问题的。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2013-10-12 16:25:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
原因：菌体种类，摇菌的毫升数，以及你的质粒拷贝数是一个。举例：
我提的是pbad-hisa/myc,从20ml的菌液中提质粒，40微升溶解质粒，浓度为103ng/μl，我不会贴图要么就可以吧图给你看看了。
赞一下 回复此楼
应助之星就是我~没错。你没有看错~
7楼2013-10-12 20:13:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王者归来001

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
天湖酒: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-10-13 17:15:13
原因：1 菌体的类型，表达菌株的质粒量就很少；
2 试剂盒上的要求很重要，裂解菌体是否充分很重要，菌体过多就需要多加裂解液，否则质粒产量就会很低；
3 过柱时可放置5min，便于膜吸附质粒；
4  洗脱质粒时可重复洗两次。
赞一下(2人) 回复此楼
坚持不懈,终会成功!
8楼2013-10-12 21:53:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 天湖酒 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +4 曼111 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:44 by 星空星月
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程（085601） +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 316求调剂 +7 梁茜雯 2026-03-19 7/350 2026-03-23 16:21 by lingjue
[考研] 求调剂材料学硕080500，总分289分 5+3 @taotao 2026-03-19 21/1050 2026-03-23 10:17 by 冠c哥
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123！
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕，总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭