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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提质粒，跑电泳发现量很少怎么回事？
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天湖酒

新虫 (初入文坛)

[求助] 提质粒，跑电泳发现量很少怎么回事？

我就是用试剂盒，按照说明书提的质粒，是两个菌的两个质粒一起提的，会有哪些可能导致提的质粒量很少呢？
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1楼 2013-10-11 20:43:37
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王者归来001

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
天湖酒: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-10-13 17:15:13
原因：1 菌体的类型，表达菌株的质粒量就很少；
2 试剂盒上的要求很重要，裂解菌体是否充分很重要，菌体过多就需要多加裂解液，否则质粒产量就会很低；
3 过柱时可放置5min，便于膜吸附质粒；
4  洗脱质粒时可重复洗两次。
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坚持不懈,终会成功!
8楼2013-10-12 21:53:34
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20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-11 22:36:45
操作的方法，不是说你按照说明书上操作就可以，提取的过程中速度要快，在这就是混匀的时候动作要尽量轻柔，不要剧烈混匀，
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2楼2013-10-11 21:18:34
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是高拷贝质粒还是低拷贝质粒？收的菌生长状态如何？
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3楼2013-10-11 23:54:09
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929519755

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、菌体数量多少
2、试剂盒是否过期
3、操作是否正确
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想你没话说
4楼2013-10-12 08:39:23
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