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天湖酒

新虫 (初入文坛)

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[求助] 提质粒，跑电泳发现量很少怎么回事？

我就是用试剂盒，按照说明书提的质粒，是两个菌的两个质粒一起提的，会有哪些可能导致提的质粒量很少呢？

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1楼 2013-10-11 20:43:37

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liyongliangx

铜虫 (小有名气)

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专业: 口腔颌面组织生物力学和生

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

分析一下：你量少有两个原因，一，可能是质料本身就少；二，你提的过程中操作不好。
给你的建议是：一，可以多提点菌液，比如原来你只用了1ML的菌液，那现在你可以用3ml 5ml 甚至更多。只要重复的离心菌液就行了。
二，操作过程中，动作要温和，其中加碱和酸的这两步比较关键，可能试剂盒里有不同的名字比如QIA的叫P2,N3 ，天根的好像是叫P2,P3。加碱上下颠倒几次，要轻柔。时间不要超过3min ，然后加酸中和就行了。

三，最后你就得检查下你的试剂盒是不是有问题，比如 wash buffer 是不是没有问题的。