| 查看: 3871 | 回复: 24 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
血小板黏附实验 拍电镜未得到想要的结果 一些问题
|
||
|
最近在做血小板黏附实验，拍了几次SEM感觉制样失败，请大家帮忙看看是哪里出了问题，热烈欢迎多多讨论。 材料是薄膜形态。 ------------------------------------------------------ 富血小板血浆（PRP)制备：采用的是兔血，耳缘取血后，以 9:1 与 109 mol/L 柠檬酸三钠溶液混合，1200rpm 离心15min，取上层清液。 黏附过程：37℃，将材料浸泡1h；PBS轻轻洗涤；用2.5%戊二醛-PBS溶液在4℃下固定24h;乙醇-水溶液(30,50,70,80,90,95,100%)梯度脱水,每个梯度30min;喷金测SEM. ------------------------------------------------------- 拍得电镜图如下   文献中的如下  和文献对比发现完全不像  ，拍出来椭圆状的不像血小板有伪足伸出。------------------------------------------------------- 疑问：1.PRP的制备中是不是有问题，而导致没有收集到富含血小板的血浆; 2.有些文献中梯度脱水溶液是用乙醇和PBS配制的，但是乙醇含量50%以后就会出现浑浊，应该是盐在乙醇中的溶解度下降导致的，所以不清楚这个乙醇-PBS到底是怎么配制的； 3.电镜图上有些点，没有具体形貌，会不会是操作过程中混入的脏东西; 4.最后的干燥，如果不用冻干机，置于干燥器中自然晾干是否可行呢. 各位前辈大牛，求解答。。。 [ Last edited by wwsswww on 2013-10-11 at 10:23 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
美国南加大(USC)药学院Prof. Yong (Tiger) Zhang课题组诚聘博士后
已经有4人回复
-
反应产物总提不上量？聊聊无机焦磷酸酶在核酸合成里的实用价值
已经有0人回复
-
生物物理、生物化学与分子生物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有265人回复
-
【经验分享】体外转录踩坑无数，挖到一款好用的国产 T7 RNA 聚合酶
已经有0人回复
-
体外转录 / PCR 总提不上产量？终于找到稳定好用的无机焦磷酸酶
已经有5人回复
-
[会议预告]2026生物医药产业发展大会
已经有0人回复
-
【产品测评分享】体外转录产量不理想、dsRNA 副产物高？T7 RNA 聚合酶实测体验
已经有4人回复
-
【交流】蛋白标签切除踩坑不断？聊聊 TEV 蛋白酶实操体会
已经有0人回复
-
【交流】SUMO 融合蛋白切标签踩坑？聊聊 SUMO 蛋白酶实操体会
已经有1人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 血小板黏附实验的基础操作，新虫一只，求指教啊~~~~
已经有23人回复
- 血小板粘附实验拍到的血小板都偏黑
已经有4人回复
- 【求助】血小板粘附试验----梯度脱水
已经有5人回复
lynne619
木虫 (著名写手)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 3003.1
- 散金: 740
- 红花: 25
- 帖子: 2666
- 在线: 717.2小时
- 虫号: 1063563
- 注册: 2010-07-24
- 专业: 生物医用高分子材料
7楼2013-10-11 10:40:30
lynne619
木虫 (著名写手)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 3003.1
- 散金: 740
- 红花: 25
- 帖子: 2666
- 在线: 717.2小时
- 虫号: 1063563
- 注册: 2010-07-24
- 专业: 生物医用高分子材料
2楼2013-10-11 10:25:44
lynne619
木虫 (著名写手)
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 3003.1
- 散金: 740
- 红花: 25
- 帖子: 2666
- 在线: 717.2小时
- 虫号: 1063563
- 注册: 2010-07-24
- 专业: 生物医用高分子材料
3楼2013-10-11 10:28:18
4楼2013-10-11 10:28:21
40