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血小板黏附实验 拍电镜未得到想要的结果 一些问题
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最近在做血小板黏附实验，拍了几次SEM感觉制样失败，请大家帮忙看看是哪里出了问题，热烈欢迎多多讨论。 材料是薄膜形态。 ------------------------------------------------------ 富血小板血浆（PRP)制备：采用的是兔血，耳缘取血后，以 9:1 与 109 mol/L 柠檬酸三钠溶液混合，1200rpm 离心15min，取上层清液。 黏附过程：37℃，将材料浸泡1h；PBS轻轻洗涤；用2.5%戊二醛-PBS溶液在4℃下固定24h;乙醇-水溶液(30,50,70,80,90,95,100%)梯度脱水,每个梯度30min;喷金测SEM. ------------------------------------------------------- 拍得电镜图如下   文献中的如下  和文献对比发现完全不像  ，拍出来椭圆状的不像血小板有伪足伸出。------------------------------------------------------- 疑问：1.PRP的制备中是不是有问题，而导致没有收集到富含血小板的血浆; 2.有些文献中梯度脱水溶液是用乙醇和PBS配制的，但是乙醇含量50%以后就会出现浑浊，应该是盐在乙醇中的溶解度下降导致的，所以不清楚这个乙醇-PBS到底是怎么配制的； 3.电镜图上有些点，没有具体形貌，会不会是操作过程中混入的脏东西; 4.最后的干燥，如果不用冻干机，置于干燥器中自然晾干是否可行呢. 各位前辈大牛，求解答。。。 [ Last edited by wwsswww on 2013-10-11 at 10:23 ] |
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lynne619
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3楼2013-10-11 10:28:18
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