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晓舞lala

新虫 (初入文坛)

[求助] 血小板黏附实验的基础操作,新虫一只,求指教啊~~~~

各位前辈,各位大虫:
小妹最近打算对材料的血液相容性做一下表征,看到文献说可以做个血小板黏附实验,但是偶不是生物出身,看了文献还是有好多疑惑的地方,求指教,求解答。。。
1。打算抽自己的了,真是为科研献身啊。。但是不知道这个全血应该抽多少合适?
有一篇文献说,用的是1个单位的人富血小板血浆。。1个单位是120ml。。这个= =!!那岂不是抽全血的更多了?!
2。联系好的抽血的地方比较远,打算拿回实验室自己离心处理,但是不知道该怎么准备?抗凝剂是要自己配制么,转数,时间都众说纷纭,多少才够呢?
3。在用PRP处理材料之前,还需要进行什么处理呢? P.S.我用的是高分子材料,不能高温,已经用放射灭菌了。。
临近毕业了,各位大牛帮个忙吧= =
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梦想与现实共舞

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fool_proof: 金币+1, 欢迎常来生物材料版应助交流 2013-05-04 20:20:55
晓舞lala: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-05-07 20:14:48
晓舞lala(红舟流星代发): 金币+5, 代扣代发金币 2013-08-31 12:35:41
看你实验用量多少了,先想好需要多少的PRP。一般全血离心大概能有一半的PRP,当然还取决于你的离心机。一般文献给的都是转数,比如1500rpm,但不同离心机的半径不同,或者你可以查一下有没有用离心力的,根据你的离心机换算成转数。实在不行可以从小低转数开始试,比如1000rpm.
抗凝剂可以买啊,肝素最好了,或者自己配点柠檬酸钠。你可以买那种抽血管,里面就有抗凝剂,也不需要抽很多的血。自己配制的不好保证细节,血小板实验从抽血到最后的过程影响因素太多,最好能让有经验的人带你做一次,要不会浪费很多时间。
血小板很难保存,在体外六小时会失活,一旦开始抽血就得控制好时间了
5楼2013-05-04 20:09:55
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梦想与现实共舞

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-05-06 10:00:09
需要多少得你自己计算了,比如你的样品都是1cm*1cm的,每个样品可以用100ul的PRP,相应的全血是200ul,一般一个样品得有三个平行样,取决于你的样品总数。当然抽得血要比需求的量稍微多一些
肯定是要加抗凝剂的,常温下大概是六小时,相当于从抽血开始算到孵育结束在六小时内
10楼2013-05-06 01:36:51
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红舟流星

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fool_proof: 金币+1, 欢迎常来生物材料版应助交流 2013-05-04 20:20:15
200CC全血吧~献血全血一个单位是200CC
为什么不找学校的医务室呢?
红楼一梦终难寻扁舟载酒且慢行落花流水依惜别月伴明星照前路
2楼2013-05-04 15:39:18
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老娘爱吃肉

木虫 (正式写手)

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感谢参与,应助指数 +1
fool_proof: 金币+1, 欢迎常来生物材料版应助交流 2013-05-04 20:20:25
可以去医院买点羊血,抗凝剂羊血带的有,离心是是3000r/min
3楼2013-05-04 16:05:44
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zhoupeng87

版主 (文学泰斗)

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fool_proof: 金币+1, 欢迎常来生物材料版应助交流 2013-05-04 20:20:37
你想用自己的还要抽,直接去医院买多方便
4楼2013-05-04 16:35:42
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晓舞lala

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 红舟流星 at 2013-05-04 15:39:18
200CC全血吧~献血全血一个单位是200CC
为什么不找学校的医务室呢?

学校的医务室越来越水了= =吊针都不打了,更别提抽血了。。。
要抽这么多么?! 200ml?
6楼2013-05-05 22:51:30
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晓舞lala

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhoupeng87 at 2013-05-04 16:35:42
你想用自己的还要抽,直接去医院买多方便

现在还有可以卖血的么。。。
7楼2013-05-05 22:52:39
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红舟流星

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引用回帖:
7楼: Originally posted by 晓舞lala at 2013-05-05 22:52:39
现在还有可以卖血的么。。。...

这个不知道了=。=b
红楼一梦终难寻扁舟载酒且慢行落花流水依惜别月伴明星照前路
8楼2013-05-05 22:56:31
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晓舞lala

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 梦想与现实共舞 at 2013-05-04 20:09:55
看你实验用量多少了,先想好需要多少的PRP。一般全血离心大概能有一半的PRP,当然还取决于你的离心机。一般文献给的都是转数,比如1500rpm,但不同离心机的半径不同,或者你可以查一下有没有用离心力的,根据你的离 ...

恩恩,非常感谢。。。你这个是目前看来最靠谱的了~~~ 你说不需要抽很多的血,这个大概是什么级别的呢,几毫升还是几十毫升这种的啊。。因为我不是专门搞生物的,问了我们学校生物所的人,他们也都不做这个,没人可以带我呃。。。
血小板容易失活,那有抗凝剂的全血是不是好一点啊?我在拿回实验室自己离心,然后尽快做好,这样的是不是好一点呢?
9楼2013-05-05 23:00:15
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