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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » MBP标签和自己9K的蛋白分不开
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liyan20220

木虫 (著名写手)

[求助] MBP标签和自己9K的蛋白分不开

融合表达MBP和自己的目的蛋白，待TEV酶切后，用Ni柱和superdex75都分不开，怎么样才能拿到自己的蛋白呢
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1楼 2013-10-03 21:54:47
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liyan20220

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by charliswu at 2013-10-05 15:55:49
MBP容易非特异性的和目的蛋白结合，可以尝试柱上酶切和离子交换纯化

好的，我试试，谢谢
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8楼2013-10-06 14:30:59
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖交流应助分子生物欢迎你 2013-10-04 22:03:00
你用的什么载体啊？NEB的？
NEB的这个载体好像没有His标签吧？按道理，MBP标签和分子筛是可以分开的，需先确认确实酶切开了。
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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
2楼2013-10-04 13:40:37
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liyan20220

木虫 (著名写手)
按照道理应该是可以分开的，我用的pET28a载体，MBP前面具有His tag
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3楼2013-10-04 21:19:08
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liyan20220

木虫 (著名写手)
我跑胶确认切开了
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4楼2013-10-04 21:19:37
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