应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » MBP标签和自己9K的蛋白分不开
51/1返回列表
查看: 1397  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

liyan20220

木虫 (著名写手)

[求助] MBP标签和自己9K的蛋白分不开

融合表达MBP和自己的目的蛋白，待TEV酶切后，用Ni柱和superdex75都分不开，怎么样才能拿到自己的蛋白呢
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-10-03 21:54:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyan20220

木虫 (著名写手)
按照道理应该是可以分开的，我用的pET28a载体，MBP前面具有His tag
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-04 21:19:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖交流应助分子生物欢迎你 2013-10-04 22:03:00
你用的什么载体啊？NEB的？
NEB的这个载体好像没有His标签吧？按道理，MBP标签和分子筛是可以分开的，需先确认确实酶切开了。
赞一下 回复此楼
VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
2楼2013-10-04 13:40:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyan20220

木虫 (著名写手)
我跑胶确认切开了
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-04 21:19:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2013-10-06 02:09:27
唔,我以前也做过这样的试验,结果只有一部分挂柱, 在flow through里面确实拿不到特别纯的
不过如果用HPLC 这个尺寸差异应该是能分开的
而且很好奇你怎么除去Tev的呢?
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
5楼2013-10-04 23:56:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭