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liyan20220

木虫 (著名写手)

[求助] MBP标签和自己9K的蛋白分不开

融合表达MBP和自己的目的蛋白,待TEV酶切后,用Ni柱和superdex75都分不开,怎么样才能拿到自己的蛋白呢
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charliswu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-06 02:09:34
liyan20220: 金币+5 2013-10-06 14:31:19
MBP容易非特异性的和目的蛋白结合,可以尝试柱上酶切和离子交换纯化
6楼2013-10-05 15:55:49
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖交流应助分子生物欢迎你 2013-10-04 22:03:00
你用的什么载体啊?NEB的?
NEB的这个载体好像没有His标签吧?按道理,MBP标签和分子筛是可以分开的,需先确认确实酶切开了。
生物资源交流QQ群:1044518333
2楼2013-10-04 13:40:37
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liyan20220

木虫 (著名写手)

按照道理应该是可以分开的,我用的pET28a载体,MBP前面具有His tag
3楼2013-10-04 21:19:08
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liyan20220

木虫 (著名写手)

我跑胶确认切开了
4楼2013-10-04 21:19:37
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