| 查看: 2225 | 回复: 3 | ||
[求助]
求助： 氨基酸OPA 柱前衍生
|
|
各位大神好： 我最近在用agilent AAA 柱子 （专用于氨基酸的检测和分离）试图做method validation, 但是发现数据误差较大 RSD =10% （即用同一个样品进样三次），百思不得其解所以跪求大神提点， 下边是我的实验条件和所用仪器 HPLC: Agilent 1100, autosampler 1313A MOBILE PHASE A: 40mM Na2HPO4, PH= 7.8 MOBLIE PHASE B: MeOH: ACN:H2O (45:45：10） OPA reagent (sigma aldrich) : 邻苯二甲醛 Borate buffer: 0.2 M, pH = 10.2 HPLC condition: 61%A :39% B isocrastic for 7 min Temp: 40 C Flow rate: 1.0ml/min uv: 338 bw 10 262 bw 16 The autosampler program: Draw 10.0 ul from borate buffer Draw 5.0 ul amino acid, 200ul/min speed Mix 15ul in air, 200ul/min speed, 5 times Wait for 0.5 min Draw 0.0 ul from ACN:H20 (50:50), 200ul/min speed, Draw 10.0 ul OPA, 200ul/min speed Mix 25ul in air, 200ul/min speed, 6 times Inject Wait for 0.1 min Needle wash in ACN:H2O(50:50) Valve pass 氨基酸和OPA的浓度比大约是1:10， 理论上我应该加了过量的OPA 所以我现在的问题是想知道问题到底出在哪里， 是我的program 有问题吗， 还是我的氨基酸和OPA的用量比例不对， 抑或是OPA 试剂有问题 跪谢！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
（调剂）一志愿报考哈尔滨工业大学0857资源与环境专业378分考生
已经有6人回复
-
262求调剂
已经有7人回复
-
材料专硕322分
已经有10人回复
-
材料调剂
已经有8人回复
-
085600，320分求调剂
已经有8人回复
-
一志愿 江南大学 085602 化工专硕 338分求调剂
已经有11人回复
-
求调剂
已经有6人回复
-
086000调剂
已经有3人回复
-
求调剂
已经有4人回复
-
0703调剂，一志愿天津大学319分
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- OPA衍生化的问题，急求~
已经有12人回复
- 氨基酸衍生剂的选择
已经有5人回复
- 20金币求各位大侠告知18种氨基酸opa柱前衍生出峰顺序
已经有5人回复
- 液相色谱分析氨基酸的衍生方法
已经有10人回复
- 氨基酸及其衍生物的硅胶正向柱分离
已经有17人回复
- 氨基酸自动分析仪和柱前衍生高效液相测氨基酸的一些问题
已经有8人回复
- 关于OPA-HPLC测定γ-氨基丁酸衍生化的问题
已经有7人回复
- 安捷伦氨基酸方法包分析氨基酸，RSD偏高怎么办？
已经有20人回复
- HPLC柱前衍生测定氨基酸含量标准品出现两个高度相关峰
已经有43人回复
- 根据某种蛋白质的氨基酸分析结果计算htot（水解度要用的常数值）
已经有11人回复
- 如何确定氨基酸衍生检测VWD检测器的波长转换时间？
已经有9人回复
- 求助水杨酸钠分析方法
已经有7人回复
- 自动部分收集器干嘛用的？
已经有3人回复
- 氨基酸衍生物合成求助，羟基变成叔氨基
已经有7人回复
- 【求助】氨基酸衍生时---丹磺酰氯的丙酮溶液是怎么配置的？
已经有9人回复
- 【求助】最近在做氨基酸的衍生，请问薄层中氨基酸显色的茚三酮溶液是怎么配制的？
已经有6人回复
- 【求助】求助：请问自动进样器怎么自动完成OPA-FMOC衍生化方法分析氨基酸？
已经有11人回复
- 【分享】手性氨基酸消旋化解决方案
已经有8人回复
- 【求助】氨基酸分析方法
已经有6人回复
- 【求助】求助：柱後衍生法问题？
已经有4人回复
- 【求助】氨基酸含量测定
已经有13人回复
2楼2013-10-02 09:29:01
chenyuanli
木虫 (小有名气)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 1755.6
- 散金: 777
- 红花: 12
- 帖子: 266
- 在线: 184.5小时
- 虫号: 825330
- 注册: 2009-08-10
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2013-11-12 16:08:59
4楼2015-07-13 09:20:08
5