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新虫 (初入文坛)

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[求助] 安捷伦氨基酸方法包分析氨基酸，RSD偏高怎么办？

我们用的是安捷伦氨基酸方法包，按照方法包中的说明是：
A相-40mM磷酸氢二钠（pH7.8）；B相-甲醇：乙腈：水（45：45：10），梯度洗脱
其余都是按照方法包中的说明进行操作的，用17种标准氨基酸混合液（商品，浓度1nmol/ul）分6个批次进行分析。

现在的问题是：

1.先说保留时间的相对标准偏差(RSD)，我的结果是：17种氨基酸的平均RSD在1.09%，而说明书上关于峰面积的平均RSD为0.18%；
2.再说峰面积的相对标准偏差(RSD)，我的结果是：17种氨基酸的平均RSD在13.08%，而说明书上关于峰面积的平均RSD为2.0%左右。

结论是我的操作时说明书上相对偏差的10倍左右

请教：问题会出在哪里？以后操作时该注意那些事情？

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1楼2012-08-17 16:22:46

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jyp2002

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【答案】应助回帖

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agilent和water都有自己的氨基酸分析方法包，我做过waters的，估计和agilent的差不多，都是柱前衍生吧？
从我上千次的操作经验来看，这么仪器公司提供的所谓重现性很好的方法包，根本就重复不出厂家所说的结果出来。楼主能够做到峰面积的RSD在13%已经不错了。你要是比较次与次之间的偏差，会发现更大。