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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 好心人帮助我看看DNA电泳图吧！
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ma_xiaowen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-08 20:17:16
可以确定的是没有蛋白 可能是RNA吧 楼主可以多消解些时间 另外就是可以试一下试剂盒的方法 对比一下 选择合适的方法
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21楼2013-10-02 23:31:29
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墨绿的下午茶

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by hkqgeoffrey at 2013-10-02 15:21:50
楼主这个电泳跑得时间再长点吧，有点没跑开，那么大块胶太节约的有点浪费了吧？再跑会说不定还有别的条带

别的条带？如果有，应该就是RNA条带了。我用RNA酶处理了，RNA酶绝对没有问题，另外如果是蛋白条带，应该在我DNA条带的上面才是啊！
我拿别的植物做DNA提取，同样的方法，同样的试剂，一点问题也没有！不是实验的问题，而是材料的问题，现在不清楚的是，材料的哪些成分对我DNA提取产生了干扰！
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22楼2013-10-07 21:42:50
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墨绿的下午茶

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
19楼: Originally posted by snzydong at 2013-10-02 22:25:01
都是其他杂质，如果下游实验要求不高，可以直接做，或者换试剂盒试试

要测序的，就是舍不得花钱才用CTAB的，而且CTAB法提其他植物没有问题，就这次的植物有问题了，而且问了许多教授...答案都是，没见过！
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23楼2013-10-07 21:44:55
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墨绿的下午茶

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
18楼: Originally posted by sunshine巧儿 at 2013-10-02 21:47:08
你好，首先这个应该不是RNA，因为他们一般都很小，不可能在这个位置，第二，也不是蛋白质，因为蛋白质会在胶空位置停滞，这个可能性最大的是DNA的讲解，因为你的材料不新鲜，还有一种可能就是你提取的时候有断裂，动 ...

我拿别的植物做DNA提取，同样的方法，同样的试剂，一点问题也没有！不是实验的问题，而是材料的问题，现在不清楚的是，材料的哪些成分对我DNA提取产生了干扰！
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24楼2013-10-07 21:46:04
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hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
22楼: Originally posted by 墨绿的下午茶 at 2013-10-07 21:42:50
别的条带？如果有，应该就是RNA条带了。我用RNA酶处理了，RNA酶绝对没有问题，另外如果是蛋白条带，应该在我DNA条带的上面才是啊！
我拿别的植物做DNA提取，同样的方法，同样的试剂，一点问题也没有！不是实验的问 ...

污染或者DNA断裂都可以产生多余条带，此外引物含有非特异性序列进行PCR所产生的产物也有可能产生多种非特异条带
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兴趣是第一导师，我爱它，因此我毫无疲倦的探索
25楼2013-10-08 11:18:09
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黑盖儿

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-08 20:17:25
我觉得有可能是你抽提的基因组降解了，那个亮带就是降解后的产物。不知你有没有注意到，那条带越亮，你的目标条带就越暗。
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我给不了你宝马香车，锦衣玉食，但我会用一辈子去疼你，爱你，保护你
26楼2013-10-08 11:52:16
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crest0708

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-08 20:17:32
你倒数第3条带，是什么样品，提的挺好啊
提基因组，一次还提这么多样品的，你真能干。
要是想让大家分析，把步骤贴出来吧，样品组成也最好详细的说明一下。同一个PROTOCOL，一个人做一种结果，有的时候就是手抖了一下


我推测是你样品污染了别的细菌或者真菌，你可以查查有没有5KB左右基因组的生物。如果是降解应该更弥散，如果是RNA，我专门提RNA都没你这个量大。
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27楼2013-10-08 14:07:18
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墨绿的下午茶

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
26楼: Originally posted by 黑盖儿 at 2013-10-08 11:52:16
我觉得有可能是你抽提的基因组降解了，那个亮带就是降解后的产物。不知你有没有注意到，那条带越亮，你的目标条带就越暗。

这个我注意了，但是降解的话，应该是那种弥散状，不像我这个样的啊！
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28楼2013-10-08 14:31:44
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墨绿的下午茶

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
25楼: Originally posted by hkqgeoffrey at 2013-10-08 11:18:09
污染或者DNA断裂都可以产生多余条带，此外引物含有非特异性序列进行PCR所产生的产物也有可能产生多种非特异条带...

我的这个只是DNA提取，没有做PCR！
若果是我动作大，DNA断裂成小片段，那也不应该是一团那样的亮的啊！污染的可能较小吧！
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29楼2013-10-08 14:33:31
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墨绿的下午茶

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
27楼: Originally posted by crest0708 at 2013-10-08 14:07:18
你倒数第3条带，是什么样品，提的挺好啊
提基因组，一次还提这么多样品的，你真能干。
要是想让大家分析，把步骤贴出来吧，样品组成也最好详细的说明一下。同一个PROTOCOL，一个人做一种结果，有的时候就是手抖 ...

我之前是提RNA的，RNA这个材料没问题，图也很漂亮，RNA已经要送公司测序了！
现在是提DNA，本来也是要打算测序的。因为实验室CTAB法已经很成熟了，几个师姐拿不同材料提取都没有问题，到我这里当然也是用CTAB继续提了啊，但是就出现胶上面的问题了。
但是我换别的材料就没有问题，胶图也很好！而且这种现象好几个教授都没见过，初步怀疑是素色的问题。
我一次做48份DNA提取，而且就这个植物，不同组织部位的DNA提取结果，胶图都不同，特别神奇！根和茎基本不会出现这种结果，叶和花基本都出现DNA主带下面一团亮的，另外，不同取材亮也不同，就花来说，量少不出现问题，量多就出现问题！
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30楼2013-10-08 14:38:53
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