| 查看: 2421 | 回复: 12 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
冰凝东金虫 (小有名气)
|
[求助]
拟南芥突变体纯合子目的基因仍有表达！真心求助！ 已有1人参与
|
|
| 购买的拟南芥T-DNA插入突变体（SALK and CS），T-DNA插入在启动子或者内含子区域都有，提取DNA经PCR鉴定出纯合子，但是以纯合子cDNA为模板进行PCR，仍然可以获得目的基因片段（已测序确定），引物是夸内含子区，且RNA做了DNA酶消化！几个突变体都是这样，不知道大家有么有类似经历，都快郁闷死了，老板天天骂，说是我的问题！真心请教高手解决问题……现行谢过…… |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有129人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助拟南芥SALK突变体纯合体鉴定中的问题
已经有3人回复
- 求助拟南芥SALK突变体纯合体鉴定中的问题
已经有15人回复
- 求助中科院的拟南芥突变体库网址信息，还有从SALK买种子的检疫证明怎么办啊
已经有5人回复
- 【求助/交流】诚心请教一个关于拟南芥突变体鉴定的问题
已经有17人回复
- 【求助/交流】我是新手，请问T-DNA与RNAi的原理
已经有6人回复
zgb1982
木虫 (正式写手)
- 应助: 46 (小学生)
- 金币: 2895.3
- 红花: 3
- 帖子: 536
- 在线: 227.2小时
- 虫号: 664342
- 注册: 2008-11-29
- 专业: 植物病理学
5楼2013-09-27 11:05:40
bullfrog325
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 193 (高中生)
- 金币: 2880.3
- 散金: 200
- 红花: 24
- 帖子: 744
- 在线: 269.5小时
- 虫号: 1864929
- 注册: 2012-06-20
2楼2013-09-25 20:11:43
冰凝东
金虫 (小有名气)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 1162.7
- 散金: 223
- 红花: 4
- 帖子: 299
- 在线: 67.9小时
- 虫号: 1550921
- 注册: 2011-12-25
- 性别: GG
- 专业: 植物生殖生物学
3楼2013-09-25 21:14:23
bullfrog325
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 193 (高中生)
- 金币: 2880.3
- 散金: 200
- 红花: 24
- 帖子: 744
- 在线: 269.5小时
- 虫号: 1864929
- 注册: 2012-06-20
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-09-27 16:14:03
冰凝东: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-09-29 14:43:27
gyesang: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-09-27 16:14:03
冰凝东: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-09-29 14:43:27
|
突变体可以上TAIR查看, 在sequence viewer里面选你要看的基因区域就可以看到突变体的插入位置. 因为SALK/SAIL一直在更新的, 或许现在有在EXON插入的T-DNA. T-DNA 大小一般10k 左右(把筛选标记的大小也算进去). 所以当T-DNA出现在基因里面时,转录的时候是完全可能把整个T-DNA一起转录出来再接着转录基因剩下的部分的(虽然TDNA里面自带转录终止片段的). 启动子一般认为是在转录起点前面2到3k的范围里面, 但是这只是一个很模糊的定义. 因为负责基因表达的启动子可以出现在基因里面(比如说AGAMOUS, 它的启动子在intron里面), 甚至3'的地方. |
4楼2013-09-26 19:11:04
20