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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质谱的多电荷问题
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笑笑2697

铁虫 (小有名气)

[求助] 质谱的多电荷问题

分子量约为2万多的蛋白，如何在打质谱的过程中避免多电荷？ 我之前打出过2万的峰，但之后就是七八千了。  不知道这种多电荷能避免不？
谢谢各位高手
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1楼 2013-09-21 07:00:02
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-21 15:12:50
什么类型的质谱? ESI还是MALDI? MALDI通常能看出来只有一个电荷的峰.
ESI如果蛋白太大的话是不可避免的吧.我记得好像一般ESI看到的都是几千分子量的峰
我觉得如果是ESI的话, 你不需要太多担心多电荷的峰. 因为你即便把多电荷的ESI质谱给审稿人看,他们也不会觉得你数据有问题
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2013-09-21 07:54:26
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笑笑2697

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-09-21 07:54:26
什么类型的质谱? ESI还是MALDI? MALDI通常能看出来只有一个电荷的峰.
ESI如果蛋白太大的话是不可避免的吧.我记得好像一般ESI看到的都是几千分子量的峰
我觉得如果是ESI的话, 你不需要太多担心多电荷的峰. 因为你即 ...

我做的是MALDI，打了好多样，就有一个是一个电荷，剩下的应该都是多电荷的。
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3楼2013-09-21 09:27:26
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-21 15:13:04
两万多的蛋白质分子量大了，多电荷裂解难以避免，你用胰蛋白酶有限水解后再去做质谱吧。
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4楼2013-09-21 12:07:31
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笑笑2697

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-09-21 12:07:31
两万多的蛋白质分子量大了，多电荷裂解难以避免，你用胰蛋白酶有限水解后再去做质谱吧。

能不能详细说一下，为什么用胰蛋白酶水解呢？
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5楼2013-09-21 15:30:47
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★
笑笑2697(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-22 21:28:22
我MALDI做过50kDa的蛋白都可以看到单电子峰的,不过确实有时候多电子峰的峰强度比单电子峰要高
你是自己操作还是提交样品让别人帮操作的?样品有没有用ziptip处理过?
实在不行你把激光稍微挪下位置,理论上应该都是一样的,不过有时候有的区域打出来的质谱就是不太好看
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
6楼2013-09-21 22:50:30
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笑笑2697

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-09-21 22:50:30
我MALDI做过50kDa的蛋白都可以看到单电子峰的,不过确实有时候多电子峰的峰强度比单电子峰要高
你是自己操作还是提交样品让别人帮操作的?样品有没有用ziptip处理过?
实在不行你把激光稍微挪下位置,理论上应该都是一 ...

样品是交给别人操作的，没用ziptip处理。现在就是想尽可能的看到单电子峰。
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7楼2013-09-22 12:47:57
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