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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Triton X-114法提取膜蛋白
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小墨825

新虫 (小有名气)

[求助] Triton X-114法提取膜蛋白

利用Triton X-114法分层得到膜蛋白（下层），怎么把Triton X-114去除？有没有可能将膜蛋白转移到水相？衷心求助！
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1楼 2013-09-17 18:52:04
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小墨825

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-09-18 19:46:31
对不起，我不太了解你的课题以及实验步骤，我能提供的帮助有限，只说一些个人想法，希望对你有用。
1. 我认为表面活性剂是一头亲水，一头疏水的，那么他与水溶液互溶时，我觉得有两种情况，要么油包水，要么水包油 ...

哎呀，您太谦虚啦！我就是利用Triton X-114的方法分层的，非离子表面活性剂Triton X-114溶液在0 ℃下分布均匀，但高于20 ℃时分为水相和去污相（含膜蛋白）。在初始溶液中加入1%的Triton X-114，进行多次分层，收集下层（占初始体积的六分之一左右）。这一部分呈油状，比较粘稠，我要做下一步的纯化，文献上柱层析里几乎都用Triton X-100.
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10楼2013-09-19 16:44:09
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-17 22:41:16
TRITON X-114:2-(2-[4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)phenoxy]ethoxy)ethanol;二乙二醇单[(1,1,3,3-四甲基丁基)苯基]醚;聚氧乙烯辛烷基苯酚醚，是一种表面活性剂，会结合到膜蛋白质的表面形成一层亲水层，而表面活性剂的疏水层会结合到膜蛋白质的分子表面，这样包裹了TRITON X-114的蛋白质本身就到了水溶液里
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2楼2013-09-17 22:24:52
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小墨825: 金币+20, ★★★很有帮助 2013-09-18 15:31:42
要把表面活性剂与膜蛋白质拆开，用分子筛层析分离出表面活性剂的疏水层会结合的膜蛋白质后，放置于烧杯的水溶液中，然后加大水溶液的非极性即可，比如加入水溶中乙醚。
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3楼2013-09-17 22:28:53
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
然后用透析和超滤很容易出去蛋白质溶液中的有机分子，留下蛋白质。
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4楼2013-09-17 22:31:27
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