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小墨825

新虫 (小有名气)

[求助] Triton X-114法提取膜蛋白

利用Triton X-114法分层得到膜蛋白(下层),怎么把Triton X-114去除?有没有可能将膜蛋白转移到水相?衷心求助!
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zhzecai

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 小墨825 at 2013-09-27 15:19:51
你的想法跟老师提的一样。初始溶液中加入1%的Triton X-114分为上层1和下层1,上层1继续加入1%的Triton X-114,再次分层,得到上层2和下层2,上层2重复上述步骤,得到下层3,合并下层1、2、3使用PBS进行分层,重复2 ...

您好,我有几个问题想请教您一下,外膜蛋白最终溶解在triton-114中能做直接细胞实验吗?我看有的文献上最终用丙酮进行蛋白质的沉淀,但是我怀疑蛋白质会不会失活啊?还有就算蛋白质沉淀了,那么用哪种溶液能溶解外膜蛋白呢?因为我想用外膜蛋白做细胞实验
17楼2013-10-19 22:56:35
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