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小墨825

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[求助] Triton X-114法提取膜蛋白

利用Triton X-114法分层得到膜蛋白（下层），怎么把Triton X-114去除？有没有可能将膜蛋白转移到水相？衷心求助！

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1楼 2013-09-17 18:52:04

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小墨825

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引用回帖:

12楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-09-23 19:12:33
我想TRITON X-114层再溶解的时候，最好TRITON X-114的浓度还为1%或更低。不知你稀释的倍数是多少，因为大量稀释后，表面活性剂在水溶液中会形成胶束，胶束的粒径可能比你透析或超滤的孔径都大，如果浓度高，那么表 ...

你的想法跟老师提的一样。初始溶液中加入1%的Triton X-114分为上层1和下层1，上层1继续加入1%的Triton X-114，再次分层，得到上层2和下层2，上层2重复上述步骤，得到下层3，合并下层1、2、3使用PBS进行分层，重复2次，得到最终的样品。所以我最终的样品Triton X-114的浓度稀释至原体积之后绝对超过1%了，我拿出一部分来做实验，随着浓缩的进行，溶液越来越黏稠，还是透不过超滤膜，可能稀释倍数还是不够大，浓度超过了cmc，大量稀释再浓缩很浪费时间啊！

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15楼2013-09-27 15:19:51

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凌波丽

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-17 22:41:16

TRITON X-114:2-(2-[4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)phenoxy]ethoxy)ethanol;二乙二醇单[(1,1,3,3-四甲基丁基)苯基]醚;聚氧乙烯辛烷基苯酚醚，是一种表面活性剂，会结合到膜蛋白质的表面形成一层亲水层，而表面活性剂的疏水层会结合到膜蛋白质的分子表面，这样包裹了TRITON X-114的蛋白质本身就到了水溶液里

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2楼2013-09-17 22:24:52

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