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小墨825

新虫 (小有名气)

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[求助] Triton X-114法提取膜蛋白

利用Triton X-114法分层得到膜蛋白（下层），怎么把Triton X-114去除？有没有可能将膜蛋白转移到水相？衷心求助！

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1楼 2013-09-17 18:52:04

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ynkuaile

木虫 (小有名气)

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引用回帖:

10楼: Originally posted by 小墨825 at 2013-09-19 16:44:09
哎呀，您太谦虚啦！我就是利用Triton X-114的方法分层的，非离子表面活性剂Triton X-114溶液在0 ℃下分布均匀，但高于20 ℃时分为水相和去污相（含膜蛋白）。在初始溶液中加入1%的Triton X-114，进行多次分层，收集 ...

我想TRITON X-114层再溶解的时候，最好TRITON X-114的浓度还为1%或更低。不知你稀释的倍数是多少，因为大量稀释后，表面活性剂在水溶液中会形成胶束，胶束的粒径可能比你透析或超滤的孔径都大，如果浓度高，那么表面活性剂是透不过去的，超滤也除不掉。我想，分层提取之后，用缓冲液溶解回原来的体积甚至更大，然后超滤浓缩其中的蛋白，然后换成1 % TRITON X-100的溶液。以上是个人想法，仅供参考。我没有做过分层萃取蛋白的实验，我还是有很多问题想你能解答我的。

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12楼2013-09-23 19:12:33

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凌波丽

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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-17 22:41:16

TRITON X-114:2-(2-[4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)phenoxy]ethoxy)ethanol;二乙二醇单[(1,1,3,3-四甲基丁基)苯基]醚;聚氧乙烯辛烷基苯酚醚，是一种表面活性剂，会结合到膜蛋白质的表面形成一层亲水层，而表面活性剂的疏水层会结合到膜蛋白质的分子表面，这样包裹了TRITON X-114的蛋白质本身就到了水溶液里

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2楼2013-09-17 22:24:52

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