24小时热门版块排行榜    

查看: 2064  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jxmingcyl

铁虫 (初入文坛)

[求助] PCR总是出现上下拖尾,前后都花费快半个月了,求虫友帮忙

这是我扩增后验证结果,目的条带大小是对的,但是出现上下拖尾了,不知道怎么办,我用的是天根的MIX,引物0.5微升的,模板稀释50和100倍结果是一样的
PCR总是出现上下拖尾,前后都花费快半个月了,求虫友帮忙
AOA扩增出现拖尾
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hia_25

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
在用primer star时,说明书上提过,退火时间的长短可能会影响条带是否出现这样的弥散,楼主可以试一下
9楼2013-09-17 16:56:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

RUI1990

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以做一个纯阴性对照,即不加模板,看看是否还会出现拖尾现象,出现了说明除模板外有试剂污染,影响PCR。
做自己
2楼2013-09-16 11:08:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

firewolfbing

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-09-16 12:24:25
第一,你的点样量有点大,看mark就知道。
第二,你的特异性还可以,条带还是很单一的。只要做些优化就可以了,不知道你有没有优化了退火温度,如果没有,找下最佳退火应该能解决问题。
第三,天根的mix没用过,不知道Mg加的是多少,你的片段的扩增效率很好,可以适当的降低Mg离子的浓度。
(你的6,7两个条带就很好看啊,很特异,很漂亮。其实你的拖带不明显的,切个胶就能做后续试验了。)
3楼2013-09-16 11:12:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

phoenix211

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我觉得这样的结果不影响后续回收吧?
楼主为什么纠结这个呢?
4楼2013-09-16 14:45:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +7 Lanmanbaby 2026-08-09 14/700 2026-08-09 23:33 by Tide man
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +4 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-09 22:24 by otj2008
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +15 且听虎啸 2026-08-07 22/1100 2026-08-09 22:13 by 布布和一二
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 21/1050 2026-08-09 17:21 by 天神眷顾
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
请填处理意见