24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1856  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jxmingcyl

铁虫 (初入文坛)

[求助] PCR总是出现上下拖尾,前后都花费快半个月了,求虫友帮忙

这是我扩增后验证结果,目的条带大小是对的,但是出现上下拖尾了,不知道怎么办,我用的是天根的MIX,引物0.5微升的,模板稀释50和100倍结果是一样的
PCR总是出现上下拖尾,前后都花费快半个月了,求虫友帮忙
AOA扩增出现拖尾
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰风颤木

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-09-17 11:31:36
楼主你好 这个感觉有点特异性扩增了 在PCR的过程中
1、要全部冰浴 可以减少特异性扩增;
2、注意加样顺序
船到桥头自然直
6楼2013-09-17 11:14:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

RUI1990

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以做一个纯阴性对照,即不加模板,看看是否还会出现拖尾现象,出现了说明除模板外有试剂污染,影响PCR。
做自己
2楼2013-09-16 11:08:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

firewolfbing

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-09-16 12:24:25
第一,你的点样量有点大,看mark就知道。
第二,你的特异性还可以,条带还是很单一的。只要做些优化就可以了,不知道你有没有优化了退火温度,如果没有,找下最佳退火应该能解决问题。
第三,天根的mix没用过,不知道Mg加的是多少,你的片段的扩增效率很好,可以适当的降低Mg离子的浓度。
(你的6,7两个条带就很好看啊,很特异,很漂亮。其实你的拖带不明显的,切个胶就能做后续试验了。)
3楼2013-09-16 11:12:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

phoenix211

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我觉得这样的结果不影响后续回收吧?
楼主为什么纠结这个呢?
4楼2013-09-16 14:45:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +8 笑笑袁 2026-04-10 8/400 2026-04-14 08:44 by screening
[考研] 332求调剂 +15 蕉蕉123 2026-04-10 15/750 2026-04-13 23:12 by pies112
[考研] 272分材料子求调剂 +41 Loy0361 2026-04-10 53/2650 2026-04-13 14:20 by 张zhihao
[考研] 322求调剂,08工科 +4 今天是个小号 2026-04-08 4/200 2026-04-13 00:20 by baobaoye
[考研] 求调剂,262机械专硕 +8 嗯yyl 2026-04-08 8/400 2026-04-12 02:31 by 秋豆菜芽
[考研] 0860004 求调剂 309分 +9 Yin DY 2026-04-08 9/450 2026-04-11 22:55 by dongdian1
[考研] 材料工程日语考生求调剂 +7 0856?调剂 2026-04-10 7/350 2026-04-11 21:33 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 求调剂 +3 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 14:13 by luhong1990
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 一志愿985机械学硕380求调剂 +5 关关雎鸠10 2026-04-11 5/250 2026-04-11 10:10 by 知念。A
[考研] 中科院总分315求调剂 +8 lallalh 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:30 by dick_runner
[考研] 265求调剂 +12 风说她早忘了 2026-04-10 13/650 2026-04-10 18:56 by chemisry
[考研] 一志愿沪9,326生物学求相关专业调剂 +4 刘墨墨 2026-04-09 4/200 2026-04-10 12:07 by pengliang8036
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 求调剂材料科学与工程一志愿985初试365分 +5 材化李可 2026-04-08 5/250 2026-04-09 17:00 by Lilly_Li
[考研] 086000生物与医药调剂 +7 awwwwwooooo 2026-04-09 7/350 2026-04-09 13:31 by 北极159263
[考研] 招收有机化学、化工,药学,食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
[考研] 313求调剂 +3 十六拾陆 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:20 by lbsjt
信息提示
请填处理意见