24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1883  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

loganfan

银虫 (正式写手)

[求助] 60-100L大肠杆菌发酵,刚开始涉及经验极度匮乏,乞求高手指导 已有2人参与

培养了几次,但结果都不太理想,主要是细菌密度不够高,搞不清楚是培养基的问题还是控制的问题。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

高密度发酵

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loganfan

银虫 (正式写手)

我们用的基础培养基是改良的LB培养基,蛋白胨10g/L,酵母浸出粉10g/L,NaCl 5g/L,K2HPO4 5g/L,实罐灭菌后加入消泡剂(1ml/L),MgCL2(2g/L)和T溶液(2ml/L)。
    种子传代方式为:单颗5ml中管培养过夜,传至60mlLB中8小时,再传至750mlLB中8小时,共6瓶(4500ml)接种至60L基础培养基中。
    培养其实阶段通过控制转速来保证溶氧值保持在25以上,当转速达到400rpm以上,通过通入压缩空气或纯氧气来保证溶氧。
   培养伊始泵入1000ml 20%葡萄糖,随后每一小时补加500ml20%葡萄糖,直至OD600值至10左右(约4h),不再补加葡萄糖,加6mM IPTG诱导,2h。收集菌体。
7楼2013-08-28 16:08:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

威妞儿

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
loganfan: 金币+2 2013-08-23 15:32:40
laozuzunzhe: 金币+3, good! 2013-08-24 08:35:50
自己可以在20-50L发酵罐中小试下,看看结果如何,从小试到中试的阶段是会发生好多变化,如果有时间的话可以自己做单因素多水平的实验,关注下pH、溶氧、搅拌转速、罐压、通气量、培养基碳氮比什么的,都会相应的有变化,只能根据你自己实际情况摸索,我的建议估计你也考虑过,所以做实验吧!
喜欢生命科学的东东,目前在做ELISA方面的实验
3楼2013-08-23 11:26:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loganfan

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 威妞儿 at 2013-08-23 11:26:03
自己可以在20-50L发酵罐中小试下,看看结果如何,从小试到中试的阶段是会发生好多变化,如果有时间的话可以自己做单因素多水平的实验,关注下pH、溶氧、搅拌转速、罐压、通气量、培养基碳氮比什么的,都会相应的有变 ...

您认为碳氮比在什么范围内比较合适呢
4楼2013-08-23 15:32:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

威妞儿

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

之前做过的C含量控制在0.35-0.5%,N含量控制在0.07-0.15%,只是我自己的经验之谈,跟你自己的实际会有差异,自己最好摸索下。 
喜欢生命科学的东东,目前在做ELISA方面的实验
5楼2013-08-23 17:18:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 272分材料子求调剂 +41 Loy0361 2026-04-10 54/2700 2026-04-14 18:00 by lhj2009
[考研] 化工学硕294分,求导师收留 +32 yzyzx 2026-04-12 36/1800 2026-04-14 17:45 by lhj2009
[考研] 一志愿沪9,326求生物学调剂 +10 刘墨墨 2026-04-13 10/500 2026-04-14 15:16 by zs92450
[考研] 求调剂,985材料与化工348分 +9 涵竹刘 2026-04-11 14/700 2026-04-13 22:26 by 涵竹刘
[考研] 一志愿2110,化学学硕310分,本科重点双非求调剂 +20 努力奋斗112 2026-04-08 20/1000 2026-04-13 14:24 by 张zhihao
[考研] 电气工程专硕320求调剂 +5 小麻子111 2026-04-10 5/250 2026-04-12 10:47 by zhouyuwinner
[考研] 291求调剂 +8 关忆北. 2026-04-11 8/400 2026-04-12 09:32 by 逆水乘风
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-08 9/450 2026-04-12 02:24 by 秋豆菜芽
[考研] 277 数一104,学硕,求调剂 +21 瓶子PZ 2026-04-09 23/1150 2026-04-11 23:12 by labixiaoqiao
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 282,求调剂 +12 jggshjkkm 2026-04-09 14/700 2026-04-11 09:39 by 猪会飞
[考研] 342电子信息专硕求调剂 +9 你让我怎么荔枝 2026-04-10 10/500 2026-04-11 08:33 by zhq0425
[考研] 吉大计算机技术331分,英语六级,求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 初试261 +3 Asht少 2026-04-10 6/300 2026-04-10 16:38 by Asht少
[考研] 一志愿沪9,326生物学求相关专业调剂 +4 刘墨墨 2026-04-09 4/200 2026-04-10 12:07 by pengliang8036
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-08 6/300 2026-04-10 11:02 by mattzhming
[考研] 调剂申请086000一志愿西北农林科技大学生物与医药320分-本科齐鲁工业大学 +3 美美女士 2026-04-09 3/150 2026-04-10 10:31 by liuhuiying09
[考研] 一志愿中科大070300化学,314分求调剂 +12 wakeluofu 2026-04-09 12/600 2026-04-10 09:57 by liuhuiying09
[考研] 一志愿中科院105500专业总分315求调剂 +6 lallalh 2026-04-09 7/350 2026-04-09 17:51 by lallalh
[考研] 349学科化学045106求调剂,化学类都可以 +8 保好懂懂 2026-04-08 8/400 2026-04-09 14:03 by xulei3024
信息提示
请填处理意见