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loganfan银虫 (正式写手)
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60-100L大肠杆菌发酵,刚开始涉及经验极度匮乏,乞求高手指导 已有2人参与
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| 培养了几次,但结果都不太理想,主要是细菌密度不够高,搞不清楚是培养基的问题还是控制的问题。 |
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高密度发酵 |
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loganfan
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2楼2013-08-23 09:42:42

3楼2013-08-23 11:26:03
loganfan
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4楼2013-08-23 15:32:29

5楼2013-08-23 17:18:52
wentanbaodao
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6楼2013-08-27 15:48:07
loganfan
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我们用的基础培养基是改良的LB培养基,蛋白胨10g/L,酵母浸出粉10g/L,NaCl 5g/L,K2HPO4 5g/L,实罐灭菌后加入消泡剂(1ml/L),MgCL2(2g/L)和T溶液(2ml/L)。 种子传代方式为:单颗5ml中管培养过夜,传至60mlLB中8小时,再传至750mlLB中8小时,共6瓶(4500ml)接种至60L基础培养基中。 培养其实阶段通过控制转速来保证溶氧值保持在25以上,当转速达到400rpm以上,通过通入压缩空气或纯氧气来保证溶氧。 培养伊始泵入1000ml 20%葡萄糖,随后每一小时补加500ml20%葡萄糖,直至OD600值至10左右(约4h),不再补加葡萄糖,加6mM IPTG诱导,2h。收集菌体。 |
7楼2013-08-28 16:08:01
loganfan
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8楼2013-08-28 16:09:44

9楼2014-06-24 12:17:32
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木虫 (正式写手)
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