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毛毛讨厌猫

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR条带不够亮的原因

pcr产物跑琼脂糖,条带不够亮,已经重复了很多次还是不够亮,为什么呢?
下一步想要做dgge,可以继续么?
PCR条带不够亮的原因
0821pcr.JPG
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毛毛讨厌猫

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
22楼: Originally posted by hkqgeoffrey at 2013-08-27 09:22:55
溴酚蓝分子量较电泳的物质而言分子量很小,所以跑得最快,在最前部,而且没有marker难以判断胶是否有问题,PCR会有失败,原因很多(比如退火温度、引物、与变性时间等等  ,楼主再多查阅资料分析下吧),还是要分析 ...

好的,谢谢了,我试着做了巢式的,结果还行
23楼2013-08-28 10:23:15
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-22 16:54:39
木有marker对照,不知道哪里出问题了
2楼2013-08-22 09:28:43
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shiq250

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-28 13:52:16
请提供marker 有可能是PCR产物浓度很低
3楼2013-08-22 09:33:15
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hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-22 16:54:55
没有DNAmarker,不过从图片上看楼主的电泳中并没有可用条带啊    而且跑电泳时间好像也短了,需要跑整个胶的2/3方可  楼主跑的是1%琼胶吗?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
兴趣是第一导师,我爱它,因此我毫无疲倦的探索
4楼2013-08-22 09:56:37
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