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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR条带不够亮的原因
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毛毛讨厌猫

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR条带不够亮的原因

pcr产物跑琼脂糖，条带不够亮，已经重复了很多次还是不够亮，为什么呢？
下一步想要做dgge，可以继续么？
PCR条带不够亮的原因
0821pcr.JPG
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1楼 2013-08-22 09:27:23
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hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
21楼: Originally posted by 毛毛讨厌猫 at 2013-08-26 20:18:03
应该不会是没有扩出来吧？之前点的marker也是在200bp左右的，如果是溴酚蓝的颜色带应该再最底部吧。我的条带一直不亮，到底是什么原因啊，着急！！...

溴酚蓝分子量较电泳的物质而言分子量很小，所以跑得最快，在最前部，而且没有marker难以判断胶是否有问题，PCR会有失败，原因很多（比如退火温度、引物、与变性时间等等  ，楼主再多查阅资料分析下吧），还是要分析下才行
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兴趣是第一导师，我爱它，因此我毫无疲倦的探索
22楼2013-08-27 09:22:55
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-22 16:54:39
木有marker对照，不知道哪里出问题了
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2楼2013-08-22 09:28:43
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shiq250

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-28 13:52:16
请提供marker 有可能是PCR产物浓度很低
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3楼2013-08-22 09:33:15
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hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-22 16:54:55
没有DNAmarker,不过从图片上看楼主的电泳中并没有可用条带啊    而且跑电泳时间好像也短了，需要跑整个胶的2/3方可  楼主跑的是1%琼胶吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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兴趣是第一导师，我爱它，因此我毫无疲倦的探索
4楼2013-08-22 09:56:37
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查看全部 23 个回答
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