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自由的柚柚

金虫 (正式写手)

[求助] 用HPLC定量分析一水溶性多肽,只用其中一个A液溶解样品可以吗

水溶性多肽用外标法定量,A液是0.1%TFA in 100% H2O,B液是0.1%TFA in 100%ACN,溶解样品时直接用A液溶解可以吗?用流动相溶解是用A液溶解吗,还是要用A、B的混合液?是梯度洗脱。另,我的待测样品是PBS体系,这样的待测样要加流动相在里面吗?如果加的话是加A液吗?待测液不是要和标准曲线同样的体系吗?

[ 来自小组 生物医药家族 ]
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自由的柚柚

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by w9412 at 2013-08-22 20:52:45
1、溶解样品是可以直接用A的,关键是要做到让样品完全溶解就ok了,如果用A无法做到的话,可以适当加入B,一般不会影响到梯度洗脱,溶解样品加多了B的话可能会造成分析时冲出,加入适量A稀释就ok了。
2、至于第二个 ...

谢谢你的帮助,关于第二个问题,我的待测样是微球释放液,所以说是PBS体系,而做标准曲线时单独用PBS溶解可以保证待测样体系与其一致,这样是不是就没必要用A液溶解了?我的标样是可以完全溶解于A液,即水-0.01%TFA的。简单说就是液相分析时不用流动相稀释可以吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2013-08-24 00:38:46
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w9412

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
红舟流星: 金币+1, 欢迎新虫来生物材料板块应助交流 2013-08-23 20:18:28
自由的柚柚: 金币+5 2013-08-26 10:35:21
自由的柚柚(红舟流星代发): 金币+3, 代扣代发金币 2013-11-30 19:33:39
1、溶解样品是可以直接用A的,关键是要做到让样品完全溶解就ok了,如果用A无法做到的话,可以适当加入B,一般不会影响到梯度洗脱,溶解样品加多了B的话可能会造成分析时冲出,加入适量A稀释就ok了。
2、至于第二个问题,你的表述没问题?
液相,分析纯化,多肽蛋白
2楼2013-08-22 20:52:45
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