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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物医学基础 » 用HPLC定量分析一水溶性多肽，只用其中一个A液溶解样品可以吗
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自由的柚柚

金虫 (正式写手)

[求助] 用HPLC定量分析一水溶性多肽，只用其中一个A液溶解样品可以吗

水溶性多肽用外标法定量，A液是0.1%TFA in 100% H2O，B液是0.1%TFA in 100%ACN，溶解样品时直接用A液溶解可以吗？用流动相溶解是用A液溶解吗，还是要用A、B的混合液？是梯度洗脱。另，我的待测样品是PBS体系,这样的待测样要加流动相在里面吗？如果加的话是加A液吗？待测液不是要和标准曲线同样的体系吗？

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热情地工作，快乐地生活
1楼 2013-08-19 20:19:36
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自由的柚柚

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by w9412 at 2013-08-22 20:52:45
1、溶解样品是可以直接用A的，关键是要做到让样品完全溶解就ok了，如果用A无法做到的话，可以适当加入B，一般不会影响到梯度洗脱，溶解样品加多了B的话可能会造成分析时冲出，加入适量A稀释就ok了。
2、至于第二个 ...

谢谢你的帮助，关于第二个问题，我的待测样是微球释放液，所以说是PBS体系，而做标准曲线时单独用PBS溶解可以保证待测样体系与其一致，这样是不是就没必要用A液溶解了?我的标样是可以完全溶解于A液，即水-0.01%TFA的。简单说就是液相分析时不用流动相稀释可以吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
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热情地工作，快乐地生活
3楼2013-08-24 00:38:46
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w9412

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
红舟流星: 金币+1, 欢迎新虫来生物材料板块应助交流 2013-08-23 20:18:28
自由的柚柚: 金币+5 2013-08-26 10:35:21
自由的柚柚(红舟流星代发): 金币+3, 代扣代发金币 2013-11-30 19:33:39
1、溶解样品是可以直接用A的，关键是要做到让样品完全溶解就ok了，如果用A无法做到的话，可以适当加入B，一般不会影响到梯度洗脱，溶解样品加多了B的话可能会造成分析时冲出，加入适量A稀释就ok了。
2、至于第二个问题，你的表述没问题？
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液相，分析纯化，多肽蛋白
2楼2013-08-22 20:52:45
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