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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于真菌培养的大侠看过来啊
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lizi0

银虫 (小有名气)

[交流] 关于真菌培养的大侠看过来啊

近期在培养真菌，请问各位大侠一下，我现在已经分离出了好多种真菌来，是不是接着要镜检形态，我后期想用测序。是不是自己还得做个PCR，能否做菌夜PCR。请指点
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1楼 2013-08-19 16:18:45
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lizi0

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yuren2009 at 2013-08-19 19:18:52
先做镜检，不过有些不产孢真菌很难鉴定，做ITS扩增很方便的，送公司测序，不算麻烦。

请问我给公司做 ITS测序的话，是送什么形式的东西给他。直接给他菌落？还是要PCR产物，谢谢
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5楼2013-08-22 21:10:45
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snqguang

新虫 (小有名气)
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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-08-19 19:41:51
镜检形态是必要的，现在真菌测序有点不好做哦，直接菌液PCR肯定不行的！
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2楼2013-08-19 16:59:50
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yuren2009

木虫 (正式写手)
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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-08-19 19:42:02
先做镜检，不过有些不产孢真菌很难鉴定，做ITS扩增很方便的，送公司测序，不算麻烦。
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3楼2013-08-19 19:18:52
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entoloma

木虫 (正式写手)
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先镜检，观察是否纯菌丝，若纯菌丝，有可能纯，也有可能不纯，若有不同菌丝（形态差别比较大），则肯定不纯；若菌丝无明显不同，则需进一步做ITS等序列。如果觉得不纯，亦可进行平板操作，挑取菌落进行培养，或用抗生素进行筛选。进攻参考。
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4楼2013-08-19 22:10:31
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lizi0

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by entoloma at 2013-08-19 22:10:31
先镜检，观察是否纯菌丝，若纯菌丝，有可能纯，也有可能不纯，若有不同菌丝（形态差别比较大），则肯定不纯；若菌丝无明显不同，则需进一步做ITS等序列。如果觉得不纯，亦可进行平板操作，挑取菌落进行培养，或用抗 ...

请问我现在已得到 很多种真菌 纯培养后，测序该如何做。谢谢
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6楼2013-08-22 21:11:43
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entoloma

木虫 (正式写手)
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6楼: Originally posted by lizi0 at 2013-08-22 21:11:43
请问我现在已得到 很多种真菌 纯培养后，测序该如何做。谢谢...

用菌丝提取DNA,进行ITS测序，送相关测序公司进行测序就可以了（我们送的生工）。
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7楼2013-08-22 22:19:27
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yuren2009

木虫 (正式写手)
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5楼: Originally posted by lizi0 at 2013-08-22 21:10:45
请问我给公司做 ITS测序的话，是送什么形式的东西给他。直接给他菌落？还是要PCR产物，谢谢...

直接送菌落花费很大，有条件就做个PCR，把产物送去，当然你自己也可以纯化后再送去。测序费用也不算高。
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8楼2013-08-22 22:25:17
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lizi0

银虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by yuren2009 at 2013-08-22 22:25:17
直接送菌落花费很大，有条件就做个PCR，把产物送去，当然你自己也可以纯化后再送去。测序费用也不算高。...

好像真菌提DNA很麻烦。不能直接做沦落PCR？
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9楼2013-08-23 14:08:44
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yuren2009

木虫 (正式写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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9楼: Originally posted by lizi0 at 2013-08-23 14:08:44
好像真菌提DNA很麻烦。不能直接做沦落PCR？...

确实不好提，有条件就用试剂盒。菌落不行吧，没听说过。
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10楼2013-08-23 16:04:50
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lizi0

银虫 (小有名气)
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10楼: Originally posted by yuren2009 at 2013-08-23 16:04:50
确实不好提，有条件就用试剂盒。菌落不行吧，没听说过。...

试剂盒好像也得先把真菌在液氮地下磨了
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11楼2013-08-23 16:33:00
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yuren2009

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
lizi0: 金币+3 2013-08-23 22:32:41
引用回帖:
11楼: Originally posted by lizi0 at 2013-08-23 16:33:00
试剂盒好像也得先把真菌在液氮地下磨了...

没错真菌破壁较难
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12楼2013-08-23 16:38:03
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lizi0

银虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by yuren2009 at 2013-08-23 16:38:03
没错真菌破壁较难...

哦。这样。真是麻烦。谢谢你
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13楼2013-08-24 23:10:02
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刘巧红

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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7楼: Originally posted by entoloma at 2013-08-22 22:19:27
用菌丝提取DNA,进行ITS测序，送相关测序公司进行测序就可以了（我们送的生工）。...

请问做真菌pcr只能用菌丝吗？最近我用菌丝做，条带很亮，但是用孢子做，扩不出来。请问您知道什么原因吗？
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14楼2014-06-09 16:23:37
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