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lizi0

银虫 (小有名气)


[交流] 关于真菌培养的大侠看过来啊

近期在培养真菌,请问各位大侠一下,我现在已经分离出了好多种真菌来,是不是接着要镜检形态,我后期想用测序。是不是自己还得做个PCR,能否做菌夜PCR。请指点
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lizi0

银虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by yuren2009 at 2013-08-19 19:18:52
先做镜检,不过有些不产孢真菌很难鉴定,做ITS扩增很方便的,送公司测序,不算麻烦。

请问我给公司做 ITS测序的话,是送什么形式的东西给他。直接给他菌落?还是要PCR产物,谢谢
5楼2013-08-22 21:10:45
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snqguang

新虫 (小有名气)


★ ★
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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流! 2013-08-19 19:41:51
镜检形态是必要的,现在真菌测序有点不好做哦,直接菌液PCR肯定不行的!
2楼2013-08-19 16:59:50
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yuren2009

木虫 (正式写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流! 2013-08-19 19:42:02
先做镜检,不过有些不产孢真菌很难鉴定,做ITS扩增很方便的,送公司测序,不算麻烦。
3楼2013-08-19 19:18:52
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entoloma

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
先镜检,观察是否纯菌丝,若纯菌丝,有可能纯,也有可能不纯,若有不同菌丝(形态差别比较大),则肯定不纯;若菌丝无明显不同,则需进一步做ITS等序列。如果觉得不纯,亦可进行平板操作,挑取菌落进行培养,或用抗生素进行筛选。进攻参考。
4楼2013-08-19 22:10:31
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lizi0

银虫 (小有名气)


引用回帖:
4楼: Originally posted by entoloma at 2013-08-19 22:10:31
先镜检,观察是否纯菌丝,若纯菌丝,有可能纯,也有可能不纯,若有不同菌丝(形态差别比较大),则肯定不纯;若菌丝无明显不同,则需进一步做ITS等序列。如果觉得不纯,亦可进行平板操作,挑取菌落进行培养,或用抗 ...

请问我现在已得到 很多种真菌 纯培养后,测序该如何做。谢谢
6楼2013-08-22 21:11:43
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entoloma

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by lizi0 at 2013-08-22 21:11:43
请问我现在已得到 很多种真菌 纯培养后,测序该如何做。谢谢...

用菌丝提取DNA,进行ITS测序,送相关测序公司进行测序就可以了(我们送的生工)。
7楼2013-08-22 22:19:27
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yuren2009

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by lizi0 at 2013-08-22 21:10:45
请问我给公司做 ITS测序的话,是送什么形式的东西给他。直接给他菌落?还是要PCR产物,谢谢...

直接送菌落花费很大,有条件就做个PCR,把产物送去,当然你自己也可以纯化后再送去。测序费用也不算高。
8楼2013-08-22 22:25:17
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lizi0

银虫 (小有名气)


引用回帖:
8楼: Originally posted by yuren2009 at 2013-08-22 22:25:17
直接送菌落花费很大,有条件就做个PCR,把产物送去,当然你自己也可以纯化后再送去。测序费用也不算高。...

好像真菌提DNA很麻烦。不能直接做沦落PCR?
9楼2013-08-23 14:08:44
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yuren2009

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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9楼: Originally posted by lizi0 at 2013-08-23 14:08:44
好像真菌提DNA很麻烦。不能直接做沦落PCR?...

确实不好提,有条件就用试剂盒。菌落不行吧,没听说过。
10楼2013-08-23 16:04:50
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lizi0

银虫 (小有名气)


引用回帖:
10楼: Originally posted by yuren2009 at 2013-08-23 16:04:50
确实不好提,有条件就用试剂盒。菌落不行吧,没听说过。...

试剂盒好像也得先把真菌在液氮地下磨了
11楼2013-08-23 16:33:00
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yuren2009

木虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lizi0: 金币+3 2013-08-23 22:32:41
引用回帖:
11楼: Originally posted by lizi0 at 2013-08-23 16:33:00
试剂盒好像也得先把真菌在液氮地下磨了...

没错真菌破壁较难
12楼2013-08-23 16:38:03
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lizi0

银虫 (小有名气)


引用回帖:
12楼: Originally posted by yuren2009 at 2013-08-23 16:38:03
没错真菌破壁较难...

哦。这样。真是麻烦。谢谢你
13楼2013-08-24 23:10:02
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刘巧红

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by entoloma at 2013-08-22 22:19:27
用菌丝提取DNA,进行ITS测序,送相关测序公司进行测序就可以了(我们送的生工)。...

请问做真菌pcr只能用菌丝吗?最近我用菌丝做,条带很亮,但是用孢子做,扩不出来。请问您知道什么原因吗?
14楼2014-06-09 16:23:37
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