| 查看: 8072 | 回复: 22 | |||||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||||||
freezymind新虫 (初入文坛)
|
[求助]
关于EDC/NHS 请教各位大牛
|
||||||
|
最近在做Fe3O4-Au纳米粒子连赫赛汀（一种单克隆抗体药物）的实验，试了挺多遍都没有理想的结果，各位大牛帮忙看看哪里出问题了： 我的具体步骤： 1、5mg连有PEG-COOH纳米粒子溶于5ml水中， 2、加入固体EDC.HCL 220mg(文献上看来的，50、100mg也都试过） sulfo-NHS 200mg(EDC.HCL/sulfo-NHS 1:1 5:1 10:1也都试过），调节PH至5.0左右，室温卵育15min(30min 1h 2h都试过）， 3、硼砂缓冲液调节至7.0（亦曾试过用超滤管去除EDC NHS后调节PH）加入赫赛汀室温2h（室温过夜、4°2h过夜都试过）。 离心后没什么沉淀出来啊，文献上说会有沉淀出现的。请大牛们帮我看看哪里出问题了，感激不尽 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 羧基活化EDC|DCC,NHS | EDC/NHS活化羧基 | 医学用书 | TOMA'S INDEX |
| 花未眠 |
» 猜你喜欢
反应产物总提不上量？聊聊无机焦磷酸酶在核酸合成里的实用价值
已经有0人回复
-
【经验分享】体外转录踩坑无数，挖到一款好用的国产 T7 RNA 聚合酶
已经有0人回复
-
生物力学与组织工程学论文润色/翻译怎么收费?
已经有237人回复
-
体外转录 / PCR 总提不上产量？终于找到稳定好用的无机焦磷酸酶
已经有5人回复
-
[会议预告]2026生物医药产业发展大会
已经有0人回复
-
【产品测评分享】体外转录产量不理想、dsRNA 副产物高？T7 RNA 聚合酶实测体验
已经有4人回复
-
【交流】蛋白标签切除踩坑不断？聊聊 TEV 蛋白酶实操体会
已经有0人回复
-
【交流】SUMO 融合蛋白切标签踩坑？聊聊 SUMO 蛋白酶实操体会
已经有1人回复
-
这些国际期刊正在招募青年编委
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- EDC-NHS活化羧基进行酰胺反应
已经有15人回复
- EDC/NHS活化金电极-硫醇后抗体固定不上
已经有24人回复
- 请教EDC/NHS做酯化反应的问题，做过的朋友帮帮忙
已经有20人回复
- 关于EDC和NHS 活化的-cooH能不能和氨基盐酸盐反应？
已经有19人回复
- EDC NHS的问题
已经有14人回复
- 关于EDC/NHS ，羟基和羧基的问题
已经有11人回复
- 请教各位一个关于EDC/NHS偶联的问题
已经有23人回复
- 求助EDC和NHS偶联蛋白的原理，完整版的
已经有6人回复
- 多糖酰胺化改性过程中EDC和NHS的配比问题
已经有4人回复
- 谷胱甘肽修饰的CdTe EDC NHS法连抗体连不上
已经有12人回复
- 【求助】关于NHS、EDC的问题
已经有11人回复
- 【求助】EDC和NHS的混合液需要现配现用吗？
已经有10人回复
- 【求助】羧基的激活剂NHS或EDC
已经有24人回复
- 【请教】请教关于EDC和NHS？
已经有18人回复
sunshaokai
金虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 754.9
- 散金: 27
- 红花: 2
- 帖子: 557
- 在线: 204小时
- 虫号: 733999
- 注册: 2009-03-28
- 专业: 纳米医学
★
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-08-20 22:43:21
markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-08-20 22:43:21
|
你可以稍微参考下这个http://wenku.baidu.com/view/ab83173510661ed9ad51f3b4.html 你可以看到从反应机理上看PEG-COOH：EDC：NHS=1：1：1就可以啦。 但是为了要保证转化率，稍微多加一些，但也不至于加到几百倍吧。 在你的试验中：5mg连有PEG-COOH纳米粒子溶于5ml水中，加入固体EDC.HCL 220mg(文献上看来的。PEG-COOH：EDC：NHS（摩尔比）应该不止1：100：100吧。 我觉得你就用我上面给你回复的步骤试一下，应该没有问题。  |
7楼2013-08-17 16:53:38
xingjiuwcc
木虫 (著名写手)
新手上路
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 1880.3
- 散金: 450
- 红花: 9
- 沙发: 11
- 帖子: 2087
- 在线: 676小时
- 虫号: 1281579
- 注册: 2011-04-29
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2013-08-17 00:08:04
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
freezymind: 金币+1, ★有帮助, 金币较少，多多见谅哈 2013-08-17 12:14:34
freezymind: 金币+4, ★★★很有帮助, 感谢达人 2013-08-17 21:22:47
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-08-17 22:33:10
感谢参与，应助指数 +1
freezymind: 金币+1, ★有帮助, 金币较少，多多见谅哈 2013-08-17 12:14:34
freezymind: 金币+4, ★★★很有帮助, 感谢达人 2013-08-17 21:22:47
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-08-17 22:33:10
| 你看下这个贴：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5331024 我觉得你的步骤有问题，一般不这样做吧。还有你的EDC.HCL/sulfo-NHS都是EDC的量高，是不是该NHS的量多投些吧。我最近也在调研文献，也要做这种反应，希望多交流下吧。 |
3楼2013-08-17 09:36:42
freezymind
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 144.1
- 红花: 1
- 帖子: 42
- 在线: 51.1小时
- 虫号: 2595622
- 注册: 2013-08-13
- 性别: GG
- 专业: 消化系统疾病诊疗新技术
4楼2013-08-17 12:27:19
20