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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【天然药物】做大极性成分分离的虫子进来交流一下呗
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【天然药物】做大极性成分分离的虫子进来交流一下呗

老板让做一种藤类植物的水部位化学成分分析+活性测试，虽然实验室里设备挺全，经费也很充裕，但是老板战线拉得比较长，分离提取这块有个两年没怎么有人做了，如今一上来就是水部位的分析，各种手足无措

植物的水提浸膏像沥青一样，又黑又黏，还可以像饭店里的拔丝芋头一样，沾点浸膏就可以拉出一根长长的丝线，这是有多高的含糖量啊。关键是，这浸膏在无水甲醇中部分溶解，乙醇中基本微溶，只有在水里才欢快地化作溶液，看来我以后经常和剧毒的甲醇打交道了。

浸膏上mci柱稍微粗分了一下，50%的甲醇，就基本把大多数东西给冲下来了，75%的甲醇流出来的就一点淡淡的黄色，旋不出什么东西；还有这色素，啧啧，最后再生柱子的时间就差不多够我再来一次粗分了。

色素多那也没什么，但是粗分下来的部分浓缩之后都是黑乎乎的，不知到底是色素没除尽还是这植物本身就含这么黑的成分。

粗分完之后该上什么柱子呢？同学建议我点几块反相板，然后上反相柱；不知道有类似经验的虫子们有什么心得体会没有

[ 来自小组 Natural Products家族 ]

[ Last edited by torekill on 2013-8-7 at 21:39 ]

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[ Last edited by torekill on 2015-11-4 at 20:38 ]
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1楼 2013-08-07 21:02:37
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yuanyuan1958

铁虫 (初入文坛)
★
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我做的也是也是极性很大的东西，是从反相上用水冲下来的，所以要用反相分离都有点困难，我的也进了液相，也离得很近。我觉得楼主可以先上反相，再试试Sephadex，然后在看看液相，还有一种分离水溶性成分的柱子叫HILIC,楼主可以关注一下
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18楼2013-09-23 12:33:39
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乘风牧云

木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
torekill: 金币+2 2013-08-14 21:44:33
杀花，我来瞎说几句，甲醇你还敢硕剧毒？我小硕三年用了500公斤二氯甲烷，无数甲醇，只能说甲醇是毛毛雨，极性大的不好分，但是也容易出新化合物，也别小看糖，有些寡糖的活性也不错，比如梓醇，最好别用硅胶柱，估计样品会死吸附在上面，理论上水可以洗脱，但是我没做过，你可以来几克小试一下，此外注意很多东西可能没紫外吸收，点板最好也多用几个显色剂，说的不对的地方请多多指教

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2楼2013-08-08 00:39:38
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zt830423

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
建议走HPLC应该用ELSD检测器，极性大的部分很多没有紫外吸收，
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17楼2013-08-27 11:11:50
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乘风牧云

木虫 (职业作家)
★ ★ ★
torekill: 金币+3 2013-08-08 09:35:01
补充下，我也觉得用反相柱分离可能会比较好，用水多冲几个柱体积，有机相比例每次增加1%或者更小，结合重结晶之类的，应该能分开吧，顺祝楼主实验顺利啊！

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3楼2013-08-08 00:47:45
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gaoyanga

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
极性大的确实很难分，反相柱继续上吧
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4楼2013-08-08 10:57:15
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分离高手

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉着可以试一下离子交换层析树脂 要么用下配体交换层析树脂
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7楼2013-08-13 16:33:42
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yyliguang

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
水部位里也有好多中等极性物，建议只做这一块，不要做水溶性的，否则可能吃力不讨好。我正在后悔之中！
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8楼2013-08-14 08:41:13
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zcczj

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by torekill at 2013-08-14 11:54:40
走了针液相，发现其中化合物的极性很相近...

极性很近那你麻烦了，分离比较苦逼，不过用分子筛填料可以试试。
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11楼2013-08-14 12:31:29
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sunnyqiu

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
水提液中会有很多盐类成分，而且用液相检测可能也会有吸收，须考虑。水可以冲硅胶柱，但是会有些硅胶下来，分离效果也不见得好，我的样品老师说多上几遍硅胶起码可以脱脱色，但是脱色效果并不好，分离效果也不怎么样，差不多各种柱子都试过了，总之，费时费力，很纠结的~但是，要分出来了那都不错的，加油吧~

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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13楼2013-08-14 17:49:33
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嘉茗ZZ

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我做极性大的混合物的时候就是用大孔树脂、凝胶、聚酰胺和反相，再就是高效液相了
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15楼2013-08-16 17:54:26
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)
试了包括mci、D101、AB-8、D3520、LSA700b这几种树脂，mci基本上50~60%的甲醇就可以大部分东西给冲下来了，至于D101、AB-8之类的大孔树脂，只能吸附少量物质，30%的乙醇就能把柱子冲得干干净净，700b死吸附很严重；打算试一下用聚酰胺
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16楼2013-08-26 20:50:29
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普通回帖

燕儿南飞~

新虫 (小有名气)
路过，祝楼主顺利。。。
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5楼2013-08-08 22:05:15
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zcczj

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你要做极性大的，干嘛还用甲醇呢，水极性就最大。看你老板想做多糖还是皂苷。
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6楼2013-08-10 15:09:08
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zcczj at 2013-08-10 15:09:08
你要做极性大的，干嘛还用甲醇呢，水极性就最大。看你老板想做多糖还是皂苷。

不是专挑极性大的做，上柱了总得用醇溶液洗脱吧
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9楼2013-08-14 11:53:55
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yyliguang at 2013-08-14 08:41:13
水部位里也有好多中等极性物，建议只做这一块，不要做水溶性的，否则可能吃力不讨好。我正在后悔之中！

走了针液相，发现其中化合物的极性很相近
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10楼2013-08-14 11:54:40
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zhangkunnb

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
极性大的东西确实不好分呐，应该还是用反相柱，梯度洗脱试试，梯度变化别那么大。估计硅胶柱是不能上了，楼主再查查资料看看能不能用其他的柱子分分看，例如离子交换柱等。
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12楼2013-08-14 15:42:40
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by zcczj at 2013-08-14 12:31:29
极性很近那你麻烦了，分离比较苦逼，不过用分子筛填料可以试试。...

抓几个大的成分来分，小的就不管了
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14楼2013-08-14 21:41:34
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by yuanyuan1958 at 2013-09-23 12:33:39
我做的也是也是极性很大的东西，是从反相上用水冲下来的，所以要用反相分离都有点困难，我的也进了液相，也离得很近。我觉得楼主可以先上反相，再试试Sephadex，然后在看看液相，还有一种分离水溶性成分的柱子叫HIL ...

多谢
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19楼2013-09-23 16:22:40
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