[交流] 我有一个关于无菌操作的疑问！ 已有4人参与

这半个月一直在做提细菌DNA，顺便进行单菌落PCR的实验。 我觉得很奇怪的就是如果我在挑取单菌落至液体培养基内进行摇床培养，我怎么才能证明我操作过程中未染杂菌，每次培养在小管子里，直接观察起来差别好大，有的觉得整个液体浑浊度较为均匀，有的就是均匀，但是液体上面会有一层膜，还有的就是上面有一部分菌靠近液体上层，下面就还有部分菌沉淀，中间部分不怎么浑浊。总觉得是污染了醋酸杆菌。因为菌种为芽孢杆菌，试过进行芽孢染色镜检，效果却很不理想，都是杆菌，而且杆状有长有短，老师说在液体培养基的杆菌会有的长有的短，有的长的还可能是短的连一起了，而且只培养差不多15个小时左右，芽孢又不多，根本不能辨别是否染菌，如果染菌了，PCR的产物很可能有污染，拿去测序岂不就是杂菌的序列吗？测序又贵，老师又是那种特别节约的人，真怕浪费他钱，结果测出来还是个错的！等着挨骂啊！ 而且现在老师让我跟另外一个老师专门学技术，可是那老师根本就不怎么教我啊，每次都让我自己做，不懂问跟他做实验的学生，自己慢慢摸索，出了结果再找他。结果出了结果找他，他让我自己寄去上海，一个礼拜之后他告诉我，温度太高没测出来，让我再做一次，我继续做了然后问他要不要用冰袋什么的，他却又说不用，那温度不还是会很高啊。现在正在等着第二次的结果，多说都是泪啊！

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