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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 紫外照射对做分子的有帮助吗
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炭笔橡皮

新虫 (初入文坛)

[求助] 紫外照射对做分子的有帮助吗

主要是做PCR为了避免污染，所以一般都在台里做。然后就牵扯到晒紫外有没有必要的问题，我本来觉得是没什么作用的，因为紫外主要是灭菌，对分子应该没什么作用。但是有人说紫外可以断裂DNA链从而避免污染，我觉得这种说法有点不靠谱。各位虫友怎么看？除了核酸，紫外对蛋白会有什么作用吗？比如灭活酶一类的。。。
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1楼 2013-08-06 09:57:22
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回帖置顶 ( 共有1个 )

gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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炭笔橡皮(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-07 09:19:00
amisking: 回帖置顶 2013-08-08 18:31:05
做PCR总共能照射多久？紫外灯强度能有多大？
如果紫外灯的确够强，对操作人员岂不是也有伤害？
如果紫外灯对DNA真有很强的断裂效果，岂不是你的模板也很危险？

这是我的疑问，可以共同探讨一下。目前常用的防止污染的办法：1. 实验室划分pre-PCR 和post-PCR区，最好是两个房间；2. 定期用bleach擦拭操作台; 3.用带滤芯的tips，防止气溶胶污染; 4.试剂分装保存，溶液现用现配，tubes和tips用新的，操作规范。
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2楼2013-08-06 10:06:21
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wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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炭笔橡皮(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-08-07 09:19:11
个人经验，污染主要来自操作过程中的一些细节处理。比如试剂分装，开盖之前先短暂离心，废弃物的处理等。紫外照射书上说是有防止污染的作用的，能够使DNA结构发生改变，我记得是形成局部二聚体而不是断裂，但是对短链效果不明显。
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4楼2013-08-06 10:36:51
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炭笔橡皮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gaoyang636 at 2013-08-06 10:06:21
做PCR总共能照射多久？紫外灯强度能有多大？
如果紫外灯的确够强，对操作人员岂不是也有伤害？
如果紫外灯对DNA真有很强的断裂效果，岂不是你的模板也很危险？

这是我的疑问，可以共同探讨一下。目前常用的防止 ...

紫外是在操作前半小时晒啊，操作的时候就关掉了。
除了用带滤芯的tip意外，我跟你用的方法差不多，但还是时不时地有污染，我现在就是郁闷污染是怎么来的
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3楼2013-08-06 10:16:46
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wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

紫外我也不经常使用，因为操作过程中引起的交叉污染紫外是解决不了的。
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5楼2013-08-06 10:38:26
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

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紫外光的用处之一活化连接在蛋白质分子表面上的光复活基团，把相关的蛋白质分子与邻近的DNA序列共价结合到一起，这在研究转录因子时是一种有效的技术。
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6楼2013-08-06 12:10:57
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 炭笔橡皮 at 2013-08-06 10:16:46
紫外是在操作前半小时晒啊，操作的时候就关掉了。
除了用带滤芯的tip意外，我跟你用的方法差不多，但还是时不时地有污染，我现在就是郁闷污染是怎么来的...

用bleach定期清理操作台和地面 是防止污染的好方法。
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7楼2013-08-06 15:18:56
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做PCR在超净台里啊，也太小心了吧。还要开着紫外，没必要吧。
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8楼2013-08-06 15:19:16
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-08-07 09:19:27
紫外照射对DNA不好，做克隆应该尽量避免过长时间的紫外照射，做胶回收时也是没有办法的。PCR不用在超净台里做，更不用开紫外灯。只要操作小心，枪头、管子干净应该可以避免污染。
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9楼2013-08-07 00:14:49
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炭笔橡皮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by gaoyang636 at 2013-08-06 15:18:56
用bleach定期清理操作台和地面 是防止污染的好方法。...

好的，谢谢，下次尝试一下
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10楼2013-08-07 09:17:55
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