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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 紫外照射对做分子的有帮助吗
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炭笔橡皮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-07 00:14:49
紫外照射对DNA不好，做克隆应该尽量避免过长时间的紫外照射，做胶回收时也是没有办法的。PCR不用在超净台里做，更不用开紫外灯。只要操作小心，枪头、管子干净应该可以避免污染。

我觉得我操作还算小心吧，枪头管子都是新的，而且每次都换，但还是有污染，不得已才在台里做，仍然有污染。。。如果是使用前晒台，也会对克隆有影响吗？
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11楼2013-08-07 09:19:43
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炭笔橡皮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wangweida2 at 2013-08-06 10:38:26
紫外我也不经常使用，因为操作过程中引起的交叉污染紫外是解决不了的。

那有什么好的方法避免交叉污染吗
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12楼2013-08-07 09:20:30
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wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by 炭笔橡皮 at 2013-08-07 09:20:30
那有什么好的方法避免交叉污染吗...

操作过程中打开有模板，引物的管盖前先离心，每次尽量只打开一个管盖，勤换手套，试剂分装使用，废弃管丢弃之前盖紧管盖再扔，废液缸定期清洗。这是我平时的操作习惯，说的有点乱，希望对你有所帮助。还有加样区，PCR区，跑胶区是要隔开的。
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炭笔橡皮
13楼2013-08-07 10:01:08
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by 炭笔橡皮 at 2013-08-07 09:19:43
我觉得我操作还算小心吧，枪头管子都是新的，而且每次都换，但还是有污染，不得已才在台里做，仍然有污染。。。如果是使用前晒台，也会对克隆有影响吗？...

你检查出是什么污染了吗？有可能是实验室形成气溶胶了。换一间屋子操作试试。
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14楼2013-08-08 04:21:03
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炭笔橡皮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-08 04:21:03
你检查出是什么污染了吗？有可能是实验室形成气溶胶了。换一间屋子操作试试。...

我们实验室做分子大都在同一个实验台里面，基本每天都有人用，包括提RNA，PCR加样什么的，我比较怀疑的是这个，但又没有办法。气溶胶要怎么解决呢
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15楼2013-08-08 09:38:38
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炭笔橡皮

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
13楼: Originally posted by wangweida2 at 2013-08-07 10:01:08
操作过程中打开有模板，引物的管盖前先离心，每次尽量只打开一个管盖，勤换手套，试剂分装使用，废弃管丢弃之前盖紧管盖再扔，废液缸定期清洗。这是我平时的操作习惯，说的有点乱，希望对你有所帮助。还有加样区， ...

非常感谢，我觉得你的经验应该挺有帮助的
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16楼2013-08-08 09:39:36
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2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这对减少PCR污染没什么帮助，主要污染来自操作，紫外线还会造成DNA模板的损伤及酶的失活
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自主创业者，捣腾生物试剂
17楼2013-08-08 10:59:13
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
炭笔橡皮: 金币+2, ★有帮助 2013-08-13 09:07:54
引用回帖:
15楼: Originally posted by 炭笔橡皮 at 2013-08-08 09:38:38
我们实验室做分子大都在同一个实验台里面，基本每天都有人用，包括提RNA，PCR加样什么的，我比较怀疑的是这个，但又没有办法。气溶胶要怎么解决呢...

用紫外照射破坏DNA，用bleacher或者稀酸擦拭工作台和实验器具表面。
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18楼2013-08-08 11:28:25
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qujiagui

新虫 (小有名气)
应该没多大的帮助，主要还是保持台面清洁吧
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19楼2013-08-12 11:43:24
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