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炭笔橡皮

新虫 (初入文坛)

[求助] 紫外照射对做分子的有帮助吗

主要是做PCR为了避免污染,所以一般都在台里做。然后就牵扯到晒紫外有没有必要的问题,我本来觉得是没什么作用的,因为紫外主要是灭菌,对分子应该没什么作用。但是有人说紫外可以断裂DNA链从而避免污染,我觉得这种说法有点不靠谱。各位虫友怎么看?除了核酸,紫外对蛋白会有什么作用吗?比如灭活酶一类的。。。
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wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
炭笔橡皮(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-08-07 09:19:11
个人经验,污染主要来自操作过程中的一些细节处理。比如试剂分装,开盖之前先短暂离心,废弃物的处理等。紫外照射书上说是有防止污染的作用的,能够使DNA结构发生改变,我记得是形成局部二聚体而不是断裂,但是对短链效果不明显。
4楼2013-08-06 10:36:51
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
炭笔橡皮(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-07 09:19:00
amisking: 回帖置顶 2013-08-08 18:31:05
做PCR总共能照射多久?紫外灯强度能有多大?
如果紫外灯的确够强,对操作人员岂不是也有伤害?
如果紫外灯对DNA真有很强的断裂效果,岂不是你的模板也很危险?

这是我的疑问,可以共同探讨一下。目前常用的防止污染的办法:1. 实验室划分pre-PCR 和post-PCR区,最好是两个房间;2. 定期用bleach擦拭操作台; 3.用带滤芯的tips,防止气溶胶污染; 4.试剂分装保存,溶液现用现配,tubes和tips用新的,操作规范。
2楼2013-08-06 10:06:21
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炭笔橡皮

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gaoyang636 at 2013-08-06 10:06:21
做PCR总共能照射多久?紫外灯强度能有多大?
如果紫外灯的确够强,对操作人员岂不是也有伤害?
如果紫外灯对DNA真有很强的断裂效果,岂不是你的模板也很危险?

这是我的疑问,可以共同探讨一下。目前常用的防止 ...

紫外是在操作前半小时晒啊,操作的时候就关掉了。
除了用带滤芯的tip意外,我跟你用的方法差不多,但还是时不时地有污染,我现在就是郁闷污染是怎么来的
3楼2013-08-06 10:16:46
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wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

紫外我也不经常使用,因为操作过程中引起的交叉污染紫外是解决不了的。
5楼2013-08-06 10:38:26
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