24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2162  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Jianxiao_H

金虫 (正式写手)

[求助] 帮看看这个primer dimer会不会有对荧光qPCR有太大影响。

实在是找不到合适的引物对了,只有看看这个有cross dimer的引物对(二聚体配对碱基数达到了5个)行不行了。
打算利用dimer tm值与产物tm值得差,来排除二聚体对荧光的影响。
但是,我不知道这个dimer的tm值是多少,我的产物tm值有85左右。
帮看看这个primer dimer会不会有对荧光qPCR有太大影响。
SXT(62FS9`9ZIX[OY8VV[@L.jpg
回复此楼
多少辛酸不可告人。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jianxiao_H

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by duoyidian at 2013-08-06 13:52:22
这种引物设计应该没问题,毕竟pcr出来的结果的数量是非常大的,想要的目的片段的数目很大,引物设计就是有舍有得。有事不能兼顾的,这时候就有取舍了,不过基本上没问题

我很赞同你的看法,我找了几天的引物了,觉得最好也只能这样了。谢谢。
多少辛酸不可告人。
8楼2013-08-06 16:10:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
二聚体还好,基本不会产生太大的影响

你的上下游GC含量相差有点大,建议进一步优化一下
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-08-05 20:54:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jianxiao_H

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-08-05 20:54:57
二聚体还好,基本不会产生太大的影响

你的上下游GC含量相差有点大,建议进一步优化一下

是的,我看了看上下游相差了百分之八,谢谢你的提醒。
但是我不知道两个引物见得gc值相差最多应该控制在百分之几的范围。
多少辛酸不可告人。
3楼2013-08-05 21:27:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by Jianxiao_H at 2013-08-05 21:27:05
是的,我看了看上下游相差了百分之八,谢谢你的提醒。
但是我不知道两个引物见得gc值相差最多应该控制在百分之几的范围。...

GC含量一般在40%-60%,上下游引物的GC含量最好一致
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-08-05 21:36:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕322分 +12 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-02 12/600 2026-04-08 11:43 by 1753564080
[考研] 265求调剂 +19 小木虫085600 2026-04-06 21/1050 2026-04-08 10:38 by 逆水乘风
[考研] 求调剂!生物与医药专硕 +9 逆转陆先生 2026-04-01 10/500 2026-04-08 10:37 by maolC
[考研] 化学0703-一志愿211-338分求调剂 +9 vants 2026-04-05 9/450 2026-04-08 10:25 by screening
[考研] 353求调剂 +6 晴空万里air 2026-04-07 6/300 2026-04-08 10:06 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +28 111623 2026-04-04 33/1650 2026-04-08 09:24 by 泽润东方
[考研] 材料科学与工程320求调剂,080500 +10 黄瓜味薯片 2026-04-06 10/500 2026-04-08 09:08 by oooqiao
[考研] 347材料专硕求调剂 +15 zj8215216 2026-04-06 15/750 2026-04-08 00:22 by JourneyLucky
[考研] 计算机11408 287 求调剂 +3 LiLe5 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:15 by shanqishi
[考研] 338求调剂 +5 小猪红色 678 2026-04-06 6/300 2026-04-07 21:18 by 乔哒哒哒
[考研] 本科生物信息学,总分362 求07 08调剂 +6 q小倩1210 2026-04-06 6/300 2026-04-07 19:40 by macy2011
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-02 14/700 2026-04-07 12:52 by Sammy2
[考研] 286求调剂 +20 Faune 2026-04-06 20/1000 2026-04-07 11:33 by 诗与自由
[考研] 385分 生物学(071000)求调剂 +12 qf626 2026-04-01 12/600 2026-04-06 17:36 by 52305043001
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-05 5/250 2026-04-06 15:40 by lin-da
[考研] 材料334求调剂 +19 Eecho# 2026-04-03 19/950 2026-04-06 08:37 by 小小树2024
[考研] 0703求调剂383分 +9 W55j 2026-04-03 9/450 2026-04-06 06:50 by houyaoxu
[考研] 085602 找调剂 +4 逆时针快乐 2026-04-02 4/200 2026-04-04 19:32 by 蓝云思雨
[考研] 330求调剂 +3 白神呜呼呼 2026-04-02 3/150 2026-04-03 10:15 by 蓝云思雨
[考研] 377求调剂 +3 RASKIN 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:45 by zzchen2000
信息提示
请填处理意见