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多少辛酸不可告人。

1楼2013-08-05 19:44:15

gyesang

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二聚体还好，基本不会产生太大的影响

你的上下游GC含量相差有点大，建议进一步优化一下

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2楼2013-08-05 20:54:57

Jianxiao_H

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2楼: Originally posted by gyesang at 2013-08-05 20:54:57
二聚体还好，基本不会产生太大的影响

你的上下游GC含量相差有点大，建议进一步优化一下

是的，我看了看上下游相差了百分之八，谢谢你的提醒。
但是我不知道两个引物见得gc值相差最多应该控制在百分之几的范围。

多少辛酸不可告人。

3楼2013-08-05 21:27:05

gyesang

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引用回帖:

3楼: Originally posted by Jianxiao_H at 2013-08-05 21:27:05
是的，我看了看上下游相差了百分之八，谢谢你的提醒。
但是我不知道两个引物见得gc值相差最多应该控制在百分之几的范围。...

GC含量一般在40%-60%，上下游引物的GC含量最好一致

学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com

4楼2013-08-05 21:36:47

yb19841014

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★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-06 09:44:54

配对的位置在中间，应该还好。建议同时订两对引物。

5楼2013-08-06 06:52:25

Jianxiao_H

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5楼: Originally posted by yb19841014 at 2013-08-06 06:52:25
配对的位置在中间，应该还好。建议同时订两对引物。

诶，对啊。我怎么就没想到顶两对儿引物呢。。

谢谢哈！！

多少辛酸不可告人。

6楼2013-08-06 08:17:28

duoyidian

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这种引物设计应该没问题，毕竟pcr出来的结果的数量是非常大的，想要的目的片段的数目很大，引物设计就是有舍有得。有事不能兼顾的，这时候就有取舍了，不过基本上没问题

7楼2013-08-06 13:52:22

Jianxiao_H

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7楼: Originally posted by duoyidian at 2013-08-06 13:52:22
这种引物设计应该没问题，毕竟pcr出来的结果的数量是非常大的，想要的目的片段的数目很大，引物设计就是有舍有得。有事不能兼顾的，这时候就有取舍了，不过基本上没问题

我很赞同你的看法，我找了几天的引物了，觉得最好也只能这样了。谢谢。

多少辛酸不可告人。

8楼2013-08-06 16:10:40