24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2152  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Jianxiao_H

金虫 (正式写手)

[求助] 帮看看这个primer dimer会不会有对荧光qPCR有太大影响。

实在是找不到合适的引物对了,只有看看这个有cross dimer的引物对(二聚体配对碱基数达到了5个)行不行了。
打算利用dimer tm值与产物tm值得差,来排除二聚体对荧光的影响。
但是,我不知道这个dimer的tm值是多少,我的产物tm值有85左右。
帮看看这个primer dimer会不会有对荧光qPCR有太大影响。
SXT(62FS9`9ZIX[OY8VV[@L.jpg
回复此楼
多少辛酸不可告人。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by Jianxiao_H at 2013-08-05 21:27:05
是的,我看了看上下游相差了百分之八,谢谢你的提醒。
但是我不知道两个引物见得gc值相差最多应该控制在百分之几的范围。...

GC含量一般在40%-60%,上下游引物的GC含量最好一致
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-08-05 21:36:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
二聚体还好,基本不会产生太大的影响

你的上下游GC含量相差有点大,建议进一步优化一下
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-08-05 20:54:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jianxiao_H

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-08-05 20:54:57
二聚体还好,基本不会产生太大的影响

你的上下游GC含量相差有点大,建议进一步优化一下

是的,我看了看上下游相差了百分之八,谢谢你的提醒。
但是我不知道两个引物见得gc值相差最多应该控制在百分之几的范围。
多少辛酸不可告人。
3楼2013-08-05 21:27:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-06 09:44:54
配对的位置在中间,应该还好。建议同时订两对引物。
5楼2013-08-06 06:52:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 264求调剂 +6 麦小叮当 2026-04-07 6/300 2026-04-07 10:13 by 无际的草原
[考研] 调剂 +12 不逢春 2026-04-05 13/650 2026-04-07 10:03 by 猪会飞
[考研] 071000生物学调剂 +7 拉提桃 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:55 by 52305043001
[考研] 求调剂 +10 chenxrlkx 2026-04-05 10/500 2026-04-06 11:31 by 猪会飞
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +10 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 18:51 by 蓝云思雨
[考研] 材料专硕322分 +11 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-02 11/550 2026-04-04 23:37 by 永字号
[考研] 413求调剂 +4 柯某某 2026-03-31 4/200 2026-04-04 22:18 by 学员6BFVa3
[考研] 292分,材料与化工,申请调剂 +22 程晴之 2026-04-01 26/1300 2026-04-04 22:03 by hemengdong
[考研] 一志愿武理材料工程302调剂环化或化工 +19 Doleres 2026-03-31 20/1000 2026-04-04 16:44 by 啊俊!
[考研] 一志愿沪985,326分求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-03 3/150 2026-04-04 11:16 by 悲伤的芋头
[考研] 305求调剂 +3 77Qi 2026-04-03 3/150 2026-04-03 23:01 by qzxyhcsy
[考研] 311求调剂 +20 zchqwer 2026-04-01 22/1100 2026-04-03 22:09 by lglzsd
[考研] 085501一志愿天工大,机械专硕求调剂,跨材料 +3 33上 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:08 by 1753564080
[考研] 求材料调剂 一志愿南昌大学 328分 +5 yyy..... 2026-04-03 5/250 2026-04-03 13:46 by 百灵童888
[考研] 数一英一285求调剂 +7 AZMK 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:03 by ms629
[考研] 312求调剂 +6 小小墨123 2026-04-02 7/350 2026-04-03 07:32 by jsw79
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 13:03 by yulian1987
[考研] 求调剂,一志愿南京师范大学计算机专硕,初试373,六级通过, +3 计算机追梦人 2026-04-01 3/150 2026-04-02 07:57 by fxue1114
[考研] 353求调剂 +4 拉钩不许变 2026-04-01 4/200 2026-04-01 18:10 by 记事本2026
[考研] 一志愿西交大080500材料学硕349 +6 jqx1258 2026-03-31 7/350 2026-03-31 21:08 by yuq
信息提示
请填处理意见