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koukaidei

木虫 (正式写手)

[求助] 求助 如何做好GPC标准曲线?

新手上路,又无人指导,在国外,盼高手不吝指教。
GPC仪器是岛津,
分析条件; 溶剂THF, 流速1.0ml/min,有四根柱子。
标样的浓度是20 mg/ml,有5个,1000,2500, 5000,11000, 17000。
每次进样5ul.
自己的样品大约在1000-2000左右。
自己制作了几次标准曲线,怎么总是有相差呢?请指教哪些地方操作不对!
附上刚做的标样图谱。
求助 如何做好GPC标准曲线?
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koukaidei

木虫 (正式写手)

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求助 如何做好GPC标准曲线?-1
0801-2.png

2楼2013-08-01 15:57:20
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koukaidei

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by koukaidei at 2013-08-01 16:57:20
重新上传图片

0801-2.png

检测器是RDI
3楼2013-08-01 16:05:07
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Pureland

木虫之王 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
紫百合LYL: 金币+1, 感谢应助 2013-08-01 16:37:59
图不是很清楚。作标准曲线需要找到每个标样的峰值淋洗体积(时间),然后用logMp对淋洗体积作图,用多项式进行拟合,得到的多项式即是GPC标准曲线。其中,Mp为标样峰值分子量是Mn乘Mw开根号。
4楼2013-08-01 16:13:13
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koukaidei

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Pureland at 2013-08-01 17:13:13
图不是很清楚。作标准曲线需要找到每个标样的峰值淋洗体积(时间),然后用logMp对淋洗体积作图,用多项式进行拟合,得到的多项式即是GPC标准曲线。其中,Mp为标样峰值分子量是Mn乘Mw开根号。

非常谢谢你的答复。这里作曲线,只要把时间和分子量输进去,然后选择曲线公式,曲线就出来了。我现在想知道的是我的操作有没有问题?因为每次出锋时间不一样,尤其是分子量为1000的样品,有10个锋。
5楼2013-08-01 16:59:17
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Pureland

木虫之王 (知名作家)

【答案】应助回帖

输的什么分子量?Mw还是Mp?应该是Mp.
6楼2013-08-01 17:03:08
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mrzhang77

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
koukaidei: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-02 08:08:22
紫百合LYL: 金币+2, 感谢应助 2013-08-02 08:50:24
你是要做calibration curve吗? 如果是的话,你需要给每个峰一个已知的Mp分子量,这个在你的标样盒子上都有。而且你的Baseline是斜的,这样做出的结果不太准。貌似你用的日文版软件,我只能告诉你一个基本的方法,然后你要动动脑筋,不难做.
在你打开的这个窗口的基础上,你已经添加了limits and baselines, 这些都不变,然后在命令栏里找到method选项,选new method命令---from blanc命令----选择做一条conventional calibration curve-----在要你输入Mp的表格里输入每个峰对应的Mp值,这个是给出的,在你的样品盒上面,如果这一步你发现有类似add narrow standards的选项,一定要选上,如果没有则直接点next----给你的calibration命名,比如2013年8月----在前一步没有发现类似add narrow standards的选项的情况下,重新在命令栏选择method选项,然后选add narrow standards。这样一条calibration curve就做好了。
7楼2013-08-01 17:52:59
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mrzhang77

金虫 (正式写手)

没及时刷新,已经有答案了。
8楼2013-08-01 17:55:04
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koukaidei

木虫 (正式写手)

内容已删除
9楼2013-08-02 08:07:25
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lgldd523

铁杆木虫 (知名作家)

你应该把仪器自己大体弄懂,这样之后做什么都顺手。用着别人设置好的条件,不知道为什么那么设置,没什么大作用
人不狠,站不稳!
10楼2013-08-02 15:09:27
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