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koukaidei

木虫 (正式写手)

[求助] 求助 如何做好GPC标准曲线?

新手上路,又无人指导,在国外,盼高手不吝指教。
GPC仪器是岛津,
分析条件; 溶剂THF, 流速1.0ml/min,有四根柱子。
标样的浓度是20 mg/ml,有5个,1000,2500, 5000,11000, 17000。
每次进样5ul.
自己的样品大约在1000-2000左右。
自己制作了几次标准曲线,怎么总是有相差呢?请指教哪些地方操作不对!
附上刚做的标样图谱。
求助 如何做好GPC标准曲线?
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mrzhang77

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
koukaidei: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-02 08:08:22
紫百合LYL: 金币+2, 感谢应助 2013-08-02 08:50:24
你是要做calibration curve吗? 如果是的话,你需要给每个峰一个已知的Mp分子量,这个在你的标样盒子上都有。而且你的Baseline是斜的,这样做出的结果不太准。貌似你用的日文版软件,我只能告诉你一个基本的方法,然后你要动动脑筋,不难做.
在你打开的这个窗口的基础上,你已经添加了limits and baselines, 这些都不变,然后在命令栏里找到method选项,选new method命令---from blanc命令----选择做一条conventional calibration curve-----在要你输入Mp的表格里输入每个峰对应的Mp值,这个是给出的,在你的样品盒上面,如果这一步你发现有类似add narrow standards的选项,一定要选上,如果没有则直接点next----给你的calibration命名,比如2013年8月----在前一步没有发现类似add narrow standards的选项的情况下,重新在命令栏选择method选项,然后选add narrow standards。这样一条calibration curve就做好了。
7楼2013-08-01 17:52:59
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koukaidei

木虫 (正式写手)

重新上传图片
求助 如何做好GPC标准曲线?-1
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2楼2013-08-01 15:57:20
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koukaidei

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by koukaidei at 2013-08-01 16:57:20
重新上传图片

0801-2.png

检测器是RDI
3楼2013-08-01 16:05:07
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Pureland

木虫之王 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
紫百合LYL: 金币+1, 感谢应助 2013-08-01 16:37:59
图不是很清楚。作标准曲线需要找到每个标样的峰值淋洗体积(时间),然后用logMp对淋洗体积作图,用多项式进行拟合,得到的多项式即是GPC标准曲线。其中,Mp为标样峰值分子量是Mn乘Mw开根号。
4楼2013-08-01 16:13:13
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