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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 高分子 » 测试表征 » 求助 如何做好GPC标准曲线？
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koukaidei

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by lgldd523 at 2013-08-02 16:09:27
你应该把仪器自己大体弄懂，这样之后做什么都顺手。用着别人设置好的条件，不知道为什么那么设置，没什么大作用

仪器是从别的组弄过来的。具体来历我不清楚。仪器怎么去弄明白，周围没有人指导，因为没人用过。也没有别的人做聚合。全靠自己摸索。
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11楼2013-08-02 16:54:06
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koukaidei

木虫 (正式写手)
内容已删除
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12楼2013-08-02 16:55:36
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mrzhang77

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
koukaidei: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-06 09:00:16
引用回帖:
9楼: Originally posted by koukaidei at 2013-08-02 08:07:25
非常感谢你的回复。我是在日本，试试你的方法。
我的操作有问题吗？为什么我的样品浓度要用那么大呢？要是用10mg/ml的话，峰出的特别低，这是为什么啊？我发现样品浓度高的时候（40 mg/ml)，出峰时间会向前移动， ...

你最好看看高分子方面的书会有帮助的。做SEC的时候，峰出来的位置和浓度确实有点关系，要看分子链在溶液中是伸展开的还是没有完全伸展开的，这样它通过柱子中微孔胶体的速度不同，流出时间也就会不同。我们配的样品溶液浓度一般在3-5mg/mL，你配的溶液太浓了，反而不好，容易把柱子堵了。我之前想提醒你这点，但是忘了。你可以把注射量增加，这要根据机器类型决定，我们的机器是自动注射，注射量设定的是100µL
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13楼2013-08-03 04:37:40
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332544875

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
koukaidei: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-08-06 09:00:28
koukaidei: 金币+3, ★★★★★最佳答案 2013-08-06 13:34:56
你好，我最近也刚好在使用岛津的GPC仪器。看了你的疑问，我也说说我的看法，大家互相探讨探讨嘛。第一，你的样品浓度是不是太大了啊？我标样浓度一般都是在1 mg/mL左右的，但是进样量比你的大（30 uL），峰强度也有 10 mV左右吧。第二，我总感觉你的标样峰分离的不是很开啊，你能不能尝试标样分成多组（三组或四组）测定，再做成标准曲线。第三，如果你的GPC仪器是使用多年的话，需不需要检验下仪器的重现性？
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koukaidei
14楼2013-08-04 12:37:10
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koukaidei

木虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by 332544875 at 2013-08-04 13:37:10
你好，我最近也刚好在使用岛津的GPC仪器。看了你的疑问，我也说说我的看法，大家互相探讨探讨嘛。第一，你的样品浓度是不是太大了啊？我标样浓度一般都是在1 mg/mL左右的，但是进样量比你的大（30 uL），峰强度也有 ...

太感谢你的回复了。我也是很想用你的方法，就是把样品浓度配稀，然后多进样，以前在国内做分析的老师也是这样说，可这里，唉，全靠自己做了尝试以后才能推翻别人的结论。这里的标样浓度全是配成10mg/ml，别的组有人做高分子反应，过来就是这样指导我，看来那个人也不怎么地。
GPC仪器有5年的历史，不知道算老的吗？ 一个样品，我重复测了一下，出锋时间一样。
你说把标样分成多组测定，这个操作，我就不知道怎么做。能告诉我操作方法吗？万分感谢。
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15楼2013-08-06 09:13:01
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koukaidei

木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 332544875 at 2013-08-04 13:37:10
你好，我最近也刚好在使用岛津的GPC仪器。看了你的疑问，我也说说我的看法，大家互相探讨探讨嘛。第一，你的样品浓度是不是太大了啊？我标样浓度一般都是在1 mg/mL左右的，但是进样量比你的大（30 uL），峰强度也有 ...

非常感谢你提出的宝贵建议。
我做了如下的尝试；标样一套有12个，我取了前10个，每个配成2mg/ml的溶液，然后分成两组，1，3，5，7，9为一组，2，4，6，8，10为一组，这样分开测，锋能得到完全分开。进样量为80ul, 最大锋高能到15mV，然后作出标准曲线，另外我也用进样量为40ul来检测锋的重现性。这样做出来的标准曲线，我自己也能相信它了。以前老板总是问我得出的数据有没有信誉度。
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16楼2013-08-06 13:42:34
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332544875

至尊木虫 (正式写手)
你好，希望我的建议能够对你有所帮助。听一个高分子专业的老师说GPC仪器5年应该还算是在正常的工作年限内。我个人认为只要GPC能够正常运行，实验数据可重复就完全可以用。样品浓度是根据样品自身的分子量来决定的，高分子量就需要低浓度，便于充分溶解。低分子量样品的浓度就可以稍微增加点。当然只要能够保证聚合物样品充分溶解就可以了。在建立标准曲线时，输入的标样分子量应该是标样的Mp值即峰值。标准曲线的线性拟合需要选用三次方的方程来拟合，R值应该大于0.99吧（具体下限我也不清楚，当然是越高越准咯）。我也是刚接触GPC的测试，大家可以互相交流下测试经验。
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17楼2013-08-08 00:38:52
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yangjing92

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 332544875 at 2013-08-04 12:37:10
你好，我最近也刚好在使用岛津的GPC仪器。看了你的疑问，我也说说我的看法，大家互相探讨探讨嘛。第一，你的样品浓度是不是太大了啊？我标样浓度一般都是在1 mg/mL左右的，但是进样量比你的大（30 uL），峰强度也有 ...

要做GPC，想问一下，混合标样配制时是两个标样称量后溶解在一起呢，还是分别配好后混合呢，比如说A和B分别称0.001g，在溶于1mL水呢，还是分别配成0.1%后1：1混合呢
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18楼2015-06-07 10:58:48
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