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koukaidei

木虫 (正式写手)

[求助] 求助 如何做好GPC标准曲线?

新手上路,又无人指导,在国外,盼高手不吝指教。
GPC仪器是岛津,
分析条件; 溶剂THF, 流速1.0ml/min,有四根柱子。
标样的浓度是20 mg/ml,有5个,1000,2500, 5000,11000, 17000。
每次进样5ul.
自己的样品大约在1000-2000左右。
自己制作了几次标准曲线,怎么总是有相差呢?请指教哪些地方操作不对!
附上刚做的标样图谱。
求助 如何做好GPC标准曲线?
0801-2.jpg
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koukaidei

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by 332544875 at 2013-08-04 13:37:10
你好,我最近也刚好在使用岛津的GPC仪器。看了你的疑问,我也说说我的看法,大家互相探讨探讨嘛。第一,你的样品浓度是不是太大了啊?我标样浓度一般都是在1 mg/mL左右的,但是进样量比你的大(30 uL),峰强度也有 ...

太感谢你的回复了。我也是很想用你的方法,就是把样品浓度配稀,然后多进样,以前在国内做分析的老师也是这样说,可这里,唉,全靠自己做了尝试以后才能推翻别人的结论。这里的标样浓度全是配成10mg/ml,别的组有人做高分子反应,过来就是这样指导我,看来那个人也不怎么地。
GPC仪器有5年的历史,不知道算老的吗? 一个样品,我重复测了一下,出锋时间一样。
你说把标样分成多组测定,这个操作,我就不知道怎么做。能告诉我操作方法吗?万分感谢。
15楼2013-08-06 09:13:01
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koukaidei

木虫 (正式写手)

重新上传图片
求助 如何做好GPC标准曲线?-1
0801-2.png

2楼2013-08-01 15:57:20
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koukaidei

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by koukaidei at 2013-08-01 16:57:20
重新上传图片

0801-2.png

检测器是RDI
3楼2013-08-01 16:05:07
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Pureland

木虫之王 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
紫百合LYL: 金币+1, 感谢应助 2013-08-01 16:37:59
图不是很清楚。作标准曲线需要找到每个标样的峰值淋洗体积(时间),然后用logMp对淋洗体积作图,用多项式进行拟合,得到的多项式即是GPC标准曲线。其中,Mp为标样峰值分子量是Mn乘Mw开根号。
4楼2013-08-01 16:13:13
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