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孤城一片

木虫 (小有名气)

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[求助] 用酚氯仿法提鱼鳍的DNA,死活提不出来，求指教已有3人参与

先说一下我的步骤，大家看看
1.取50到100微克组织样，加600ul组织提取液，加20ul蛋白酶K，55度消化至澄清。
2.加600ul酚：氯仿异：异戊醇，此步抽提两次
3.十分之一体积3M乙酸钠，加两倍体积冷乙醇沉淀30min，4度离心8000r 5min
4.百分之七十冷乙醇洗两次
5.100-200ul溶沉淀
请各位给点意见，现在都快提吐了

20120801.jpg

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本意探花郎，奈何芷若香；寄意予青陆，共沐好蟾光。

1楼2013-08-01 07:09:06

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引用回帖:

7楼: Originally posted by akailiu at 2013-08-01 11:31:04
没看清楚点样孔在上还是下，如果是在上面的话，下面这么一大片小片段，到像是RNA!
建议提取基因组时别太用力，另外用乙醇沉淀时间，最好在-20度2小时以上，或者用异丙醇沉淀半小时，沉淀离心在12000以上！

点样孔在上边，下面是RNA,我是静置了半个小时，谢谢建议，能不能把你们的方法步骤说一下，现在很是困惑了

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