应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用酚氯仿法提鱼鳍的DNA,死活提不出来，求指教
181/2返回列表12下一页
查看: 2096  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

孤城一片

木虫 (小有名气)

[求助] 用酚氯仿法提鱼鳍的DNA,死活提不出来，求指教 已有3人参与

先说一下我的步骤，大家看看
1.取50到100微克组织样，加600ul组织提取液，加20ul蛋白酶K，55度消化至澄清。
2.加600ul酚：氯仿异：异戊醇，此步抽提两次
3.十分之一体积3M乙酸钠，加两倍体积冷乙醇沉淀30min，4度离心8000r 5min
4.百分之七十冷乙醇洗两次
5.100-200ul溶沉淀
请各位给点意见，现在都快提吐了
用酚氯仿法提鱼鳍的DNA,死活提不出来，求指教
20120801.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
本意探花郎，奈何芷若香；寄意予青陆，共沐好蟾光。
1楼 2013-08-01 07:09:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

一直寂寞的鱼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-08-01 16:20:09
考虑下你的试剂是否过期或者损坏
赞一下(1人) 回复此楼
幸福永远
2楼2013-08-01 10:30:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

akailiu

木虫 (著名写手)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-08-01 16:20:19
是不是太用力振荡了，片段都打碎了！
赞一下 回复此楼
3楼2013-08-01 11:06:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孤城一片

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 一直寂寞的鱼 at 2013-08-01 10:30:05
考虑下你的试剂是否过期或者损坏

过期不至于，刚配的，损坏？不确定，有这么脆弱吗

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
本意探花郎，奈何芷若香；寄意予青陆，共沐好蟾光。
4楼2013-08-01 11:09:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孤城一片

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by akailiu at 2013-08-01 11:06:57
是不是太用力振荡了，片段都打碎了！

抽提是是用力晃了，到不至于上边那么干净吧，这几次都这样，很是纠结

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
本意探花郎，奈何芷若香；寄意予青陆，共沐好蟾光。
5楼2013-08-01 11:11:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

523069653

银虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2013-08-01 16:20:30
楼主 我也是提鳍条的DNA的 但是我用的是试剂盒  很容易提出来的
赞一下 回复此楼
6楼2013-08-01 11:18:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

akailiu

木虫 (著名写手)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-08-01 16:20:38
没看清楚点样孔在上还是下，如果是在上面的话，下面这么一大片小片段，到像是RNA!
建议提取基因组时别太用力，另外用乙醇沉淀时间，最好在-20度2小时以上，或者用异丙醇沉淀半小时，沉淀离心在12000以上！
赞一下 回复此楼
7楼2013-08-01 11:31:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孤城一片

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by akailiu at 2013-08-01 11:31:04
没看清楚点样孔在上还是下，如果是在上面的话，下面这么一大片小片段，到像是RNA!
建议提取基因组时别太用力，另外用乙醇沉淀时间，最好在-20度2小时以上，或者用异丙醇沉淀半小时，沉淀离心在12000以上！

点样孔在上边，下面是RNA,我是静置了半个小时，谢谢建议，能不能把你们的方法步骤说一下，现在很是困惑了

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
本意探花郎，奈何芷若香；寄意予青陆，共沐好蟾光。
8楼2013-08-01 11:44:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孤城一片

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 523069653 at 2013-08-01 11:18:26
楼主 我也是提鳍条的DNA的 但是我用的是试剂盒  很容易提出来的

你用的是什么试剂盒？最近很是纠结
赞一下 回复此楼
本意探花郎，奈何芷若香；寄意予青陆，共沐好蟾光。
9楼2013-08-01 13:21:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

睿智的锐志

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-08-01 16:20:52
1.多取点样品组织样，
3.4度离心8000r 5min （注意是多少g?）
感觉是样品离心力不够
赞一下 回复此楼
10楼2013-08-01 15:38:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 孤城一片 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 7/350 2026-08-04 03:35 by k7OM8YghWbkC
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 6/300 2026-08-04 03:34 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 5/250 2026-08-04 03:30 by k7OM8YghWbkC
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 03:27 by k7OM8YghWbkC
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 4/200 2026-08-04 03:25 by k7OM8YghWbkC
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 12/600 2026-08-04 03:17 by k7OM8YghWbkC
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 02:10 by Ocx3OKOzGU4q
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 8/400 2026-08-03 16:02 by yanghuping
[高分子] UV压敏胶开发 +3 ichall 2026-07-30 5/250 2026-08-03 14:40 by Sunrisepay
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 16/800 2026-08-03 12:23 by fuweiguochen
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +19 低垂的野花 2026-07-31 25/1250 2026-08-03 09:25 by gy116024
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[教师之家] 基础研究怎么拉横向，学校到款任务越来越多，难以完成 拉横向，都有哪些途径啊 +8 锦衣卫寒战 2026-07-28 12/600 2026-08-03 08:22 by syl200707
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 系统今天又提示维护了，估计离放榜不远了 +11 winnerche 2026-07-29 15/750 2026-07-30 23:08 by jnhyjjm
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭