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孤城一片

木虫 (小有名气)

[求助] 用酚氯仿法提鱼鳍的DNA,死活提不出来,求指教已有3人参与

先说一下我的步骤,大家看看
1.取50到100微克组织样,加600ul组织提取液,加20ul蛋白酶K,55度消化至澄清。
2.加600ul酚:氯仿异:异戊醇,此步抽提两次
3.十分之一体积3M乙酸钠,加两倍体积冷乙醇沉淀30min,4度离心8000r 5min
4.百分之七十冷乙醇洗两次
5.100-200ul溶沉淀
请各位给点意见,现在都快提吐了
用酚氯仿法提鱼鳍的DNA,死活提不出来,求指教
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本意探花郎,奈何芷若香;寄意予青陆,共沐好蟾光。
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akailiu

木虫 (著名写手)


gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-08-01 16:20:19
是不是太用力振荡了,片段都打碎了!
3楼2013-08-01 11:06:57
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akailiu

木虫 (著名写手)


gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-08-01 16:20:38
没看清楚点样孔在上还是下,如果是在上面的话,下面这么一大片小片段,到像是RNA!
建议提取基因组时别太用力,另外用乙醇沉淀时间,最好在-20度2小时以上,或者用异丙醇沉淀半小时,沉淀离心在12000以上!
7楼2013-08-01 11:31:04
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