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454277617

金虫 (小有名气)

[求助] 间接竞争ELISA中OD值测定结果有问题

用不同浓度的免疫原进行竞争,最后测定OD值时,发现结果比阳性对照还高,应该不是操作污染的问题。想知道还会有什么原因导致这种现象呢?
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454277617

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jfj_tj at 2013-07-28 17:20:25
做竞争ELISA的话,首先有没有梯度是关键,也就是竞争趋势,就是它是否随着你的竞争抗原的浓度增高而OD值有下降趋势呢,然后再关注阳性对照,至于它比你的阳性对照(没有加小分子的孔)值大,确实有点小问题,你可以 ...

嗯 ,好的。我觉得稀释加样和洗版应该没问题的。HRP的浓度不知道会有什么影响?是否是因为我包被浓度过高而抑制了反应呢?
4楼2013-07-29 17:13:47
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changting

铜虫 (小有名气)


myprayer: 金币+1, 鼓励积极交流发帖,分子生物期待你的更多精彩 2013-07-27 13:54:16
这应该正常吧,有时候浓度高了,就会这样啊
2楼2013-07-26 20:47:31
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jfj_tj

木虫 (正式写手)

免疫学兴趣家

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做竞争ELISA的话,首先有没有梯度是关键,也就是竞争趋势,就是它是否随着你的竞争抗原的浓度增高而OD值有下降趋势呢,然后再关注阳性对照,至于它比你的阳性对照(没有加小分子的孔)值大,确实有点小问题,你可以找找自己稀释加样的问题、洗板的问题或者HRP的浓度问题等等,这些都可以通过一些对照试验解决的。
Orbetterit,orenjoyit!
3楼2013-07-28 17:20:25
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jfj_tj

木虫 (正式写手)

免疫学兴趣家

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 454277617 at 2013-07-29 17:13:47
嗯 ,好的。我觉得稀释加样和洗版应该没问题的。HRP的浓度不知道会有什么影响?是否是因为我包被浓度过高而抑制了反应呢?...

你做竞争之前没有做个棋盘滴定优化一个包被原浓度和一抗浓度吗?这个实验就可以解决包被原浓度和一抗的问题,先设计好方案再进行试验,避免走弯路,希望对你有用。
Orbetterit,orenjoyit!
5楼2013-07-30 08:52:55
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