| 查看: 2969 | 回复: 5 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
AlbaRosea金虫 (初入文坛)
|
[求助]
PCAMBIA1300系列载体表达初始ATG
|
||
|
各位大侠、 请问一下就是pCAMBIA1301,1304等几个载体里边。顺时针的35s启动子下游，是从哪里的ATG开始读的呀？如果用ncoI 和bgl II 是不是都是从NCO I 的ATG开始读的呀？那么如果用这两个酶切位点，是不是都要在目标序列里补上两个碱基啊才能保证不会移码啊？（ 1 catggtagat ctgactagta aaggagaaga，摘自http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/AF234298） 生物基础薄弱啊。忘高人指点一下啊。谢谢。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 生物科学系列 |
» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有211人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- pAN7-1质粒分析
已经有18人回复
- 卡那霉素的基因序列是什么
已经有3人回复
- 质粒pCAMBIA1300转入农杆菌EHA105中的问题？
已经有7人回复
- 【其他】载体交换！
已经有12人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
AlbaRosea: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢。。太谢谢了。。 2013-07-13 16:12:49
AlbaRosea: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢。。太谢谢了。。 2013-07-13 16:12:49
|
linker有很多种，就是短小的序列不形成高级折叠，使融合蛋分别独立折叠。常用的有甘氨酸linker。构建载体的时候往往在插入的位点与要融合的标签直接有一些碱基，所以通常情况下不做任何处理也往往可以成功表达出融合蛋白。我只是提醒一下而已。 目的基因前面加两个碱基一般是比较随意的，只要不形成终止子或者Pro这种对蛋白折叠构象发生较大影响的氨基酸就可以了。表达出来的蛋白比原来的目标蛋白多两个氨基酸，你的ATG可以保留。多两个氨基酸一般不会对蛋白的结构和功能造成什么影响。 |
6楼2013-07-13 09:18:19
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-07-11 07:52:20
AlbaRosea
金虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 613.8
- 帖子: 25
- 在线: 41.3小时
- 虫号: 1329619
- 注册: 2011-06-23
- 性别: MM
- 专业: 观赏园艺学
3楼2013-07-12 20:10:35
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
4楼2013-07-12 23:05:48
25